多分析サスペンションアレイを使用した不妊の中国の男性におけるDazl SNP260およびSNP386の分析

本研究の目的は、多分析懸濁液アレイ（MASA）を使用した中国の男性の2つの単一ヌクレオチド多型（SNP）と不妊症との関連を調査することでした。正常な核型があり、アゾススポルミア因子の微小化が行われなかった、アゾススポルミアまたは重度のオリゴス脂肪症（精子密度<5x106/ml、非衰弱）の合計196人の男性患者は、コントロールとしての40人の健康な肥沃な男性とともに動員されました。Azoospermia様（DAZL）遺伝子で削除された2つのSNP、SNP260およびSNP386は、MASAテクノロジーと組み合わせた対立遺伝子特異的プライマーエクステンション（ASPE）によって遺伝子型にされました。SNP260A> GおよびSNP386A> G変異は、不妊症の男性で発見されました。SNP260は、SNP386ではなく、コントロールグループで検出可能でした。コントロールと患者の突然変異率は、SNP260でそれぞれ2.5および3.06％、SNP386でそれぞれ0および2.04％でした。χ2分析では、肥沃な男性と不妊の男性の間の突然変異の頻度の有意な差は特定されませんでした。結論として、SNPジェノタイピングのASPEとMASAの方法の組み合わせは、高スループットで、正確で費用効率が高かった。この方法は、DAZL遺伝子のSNP多型を検出するために適用されました。また、A260GもDAZLのA386G多型も、中国の人口の男性の不妊症に関与しているようには見えませんでした。

The aim of the present study was to investigate the association between two single nucleotide polymorphisms (SNPs) and infertility in Chinese males using multi-analyte suspension array (MASA). A total of 196 male patients with azoospermia or severe oligospermia (sperm density <5x106/ml, non‑obstructed) who had a normal karyotype and no azoospermia factor microdeletions were recruited, along with 40 healthy, fertile males as controls. Two SNPs of the deleted in azoospermia-like (DAZL) gene, SNP260 and SNP386, were genotyped by allele‑specific primer extension (ASPE) combined with MASA technology. The SNP260A>G and SNP386A>G mutations were found in the males with infertility. The SNP260, but not the SNP386, mutation was detectable in the control group. The mutation rates in the controls and patients were 2.5 and 3.06% for SNP260, and 0 and 2.04% for SNP386, respectively. A χ2 analysis did not identify any significant differences in the frequency of either mutation between the fertile and infertile males. In conclusion, the combination of ASPE and MASA methods for SNP genotyping was high‑throughput, accurate and cost‑efficient. The method was applied to detect SNP polymorphisms in the DAZL gene; and neither the A260G nor the A386G polymorphism of DAZL appeared to be involved in male infertility in the Chinese population.