Prolylcarbox -Peptidaseは、プラズマPrekallikrein（Fletcher Factor）を独立して活性化します

プロリルカルボキシペプチダーゼアイソフォーム1（PRCP1）は、アンジオテンシンII、アンジオテンシンIII、αMSH1-13、およびデザルグ（9）ブラジキニンなどの多数のオートクリンとホルモンを調節することができます。これは、C末端Pro-X結合を切断することによって行われます。また、最近の研究は、ヒトPRCP1が、特性化されていないメカニズムを介して血漿プレカリクレイン（PK）を内皮細胞でカリクレインに活性化することを示しています。この研究は、PKのPRCP1結合相互作用と切断部位を特定することを目的としています。最近、ヒトPRCP1の新しいスプライスバリアントをコードするcDNAが特定されました。このアイソフォームは、推定されたアミノ酸配列のN末端領域でのみ異なっていました。構造的および機能的研究を使用して、PRCP1とPKとの相互作用を調査するために、ペプチドマッピングと部位指向変異誘発アプローチの組み合わせを採用しました。1）分泌タンパク質のn末端から、2）アクティブサイトポケットの開口部にまたがる3）の3つのPRCPペプチド、3）二量体化領域では、内皮細胞上のPKのPRCP活性化を阻害します。調査では、PKのPRCP切断部位がC末端Pro 637（P（637））とALA 638（A（638））の間であるという仮説もテストされました。C末端アラニン変異誘発または停止コドンによるPKの組換え型は、PRCPによって野生型PKと等しく活性化されます。結論として、PRCP1はPK活性化のために複数のサイトでPKと相互作用します。PRCP1はまた、PKのFXIIA活性化を促進し、PKの活性化部位がFXIIAの活性化と同一ではないことを示唆しています。

Prolylcarboxypeptidase isoform 1 (PRCP1) is capable of regulating numerous autocrines and hormones, such as angiotensin II, angiotensin III, αMSH1-13, and DesArg(9) bradykinin. It does so by cleaving a C-terminal PRO-X bond. Recent work also indicates that the human PRCP1 activates plasma prekallikrein (PK) to kallikrein on endothelial cells through an uncharacterized mechanism. This study aims to identify PRCP1 binding interaction and cleavage site on PK. Recently, a cDNA encoding a novel splice variant of the human PRCP1 was identified. This isoform differed only in the N-terminal region of the deduced amino acid sequence. Using structural and functional studies, a combination of peptide mapping and site-directed mutagenesis approaches were employed to investigate the interaction of PRCP1 with PK. Three PRCP peptides, in decreasing order of potency, from 1) the N-terminus of the secreted protein, 2) spanning the opening of the active site pocket, and 3) in the dimerization region inhibit PRCP activation of PK on endothelial cells. Investigations also tested the hypothesis that PRCP cleavage site on PK is between its C-terminal Pro 637 (P(637)) and Ala 638 (A(638)). Recombinant forms of PK with C-terminal alanine mutagenesis or a stop codon is activated equally as wild type PK by PRCP. In conclusion, PRCP1 interacts with PK at multiple sites for PK activation. PRCP1 also enhances FXIIa activation of PK, suggesting that its activation site on PK is not identical to that of FXIIa.