サルモネラ属、サルモネラ亜種I、Salm Enteritidis、Salm Heidelberg、Salm Typhimuriumの同時検出のための多重PCRアッセイの開発

目的：この研究の目的は、サルモネラ属Salmonella subspを同時に検出できる多重PCRアッセイを開発することでした。私、サルム。Enteritidis、Heidelberg、およびTyphimuriumこれらのサルモネラ血清型は、家禽産物に関連する最も一般的な分離株であるためです。 方法と結果：5つのプライマーを使用してマルチプレックスPCRを確立し、鶏や農場環境からのサルモネラ分離株に適用しました。これらの分離株は、サルモネラ亜種として特定されました。Iおよび66個の分離株のうち16個がSALMに分類されました。Enteritidis、ハイデルベルクまたはTyphimuriumは検出されませんでした。また、マルチプレックスPCRの特異性と感度を評価するために、鶏の胸肉に3つのサルモネラ株をスパイクし、QPCRを評価して、これらのサンプルのサルモネラの定量化を最適化しました。最適化されたマルチプレックスPCRとQPCRは、約を検出できます。2・2グラムあたりのサルモネラの2 CFU濃縮後。 結論：マルチプレックスPCRとQPCRは、迅速かつ一貫した結果を提供します。また、これらの技術は、汚染された家禽、食品、環境サンプルにおけるサルモネラの検出と定量化に役立ちます。 研究の重要性と影響：鶏肉におけるサルモネラ血清型の迅速な検出のための戦略は、ヒトのサルモネラ症の発生率をさらに減らすために必要です。最適化されたマルチプレックスPCRは、家禽製品の一般的なサルモネラ血清型を検出するのに役立ちます。

AIMS: The aim of this research was to develop multiplex PCR assay that could simultaneously detect Salmonella genus, Salmonella subsp. I, Salm. Enteritidis, Heidelberg and Typhimurium because these Salmonella serovars are the most common isolates associated with poultry products. METHODS AND RESULTS: Five primers were utilized to establish multiplex PCR and applied to Salmonella isolates from chickens and farm environments. These isolates were identified as Salmonella subsp. I and 16 of 66 isolates were classified as Salm. Enteritidis, while Heidelberg or Typhimurium was not detected. We also spiked three Salmonella strains on chicken breast meat to evaluate the specificity and sensitivity of multiplex PCR as well as qPCR to optimize quantification of Salmonella in these samples. The optimized multiplex PCR and qPCR could detect approx. 2·2 CFU of Salmonella per gram after 18 h enrichment. CONCLUSIONS: The multiplex PCR and qPCR would provide rapid and consistent results. Also, these techniques would be useful for the detection and quantification of Salmonella in contaminated poultry, foods and environmental samples. SIGNIFICANCE AND IMPACT OF THE STUDY: The strategy for the rapid detection of Salmonella serovars in poultry is needed to further reduce the incidence of salmonellosis in humans. The optimized multiplex PCR will be useful to detect prevalent Salmonella serovars in poultry products.