スペインのマドリードでのヒトリーシュマニア症の発生からのphlebotomus perniciosusからのリーシュマニアの分離株のex vivo毒性の特性評価

背景：2009年半ば以降、スペインのマドリードでのヒトリーシュマニア症の発生には、560以上の臨床症例が関与しています。症例の多くは、新しく建設されたグリーンパーク（ボスケスール）周辺の地域に住んでいる人々で発生しました。このペリバン公園は、砂のハエ（リーシュマニア乳中のベクター）に適した生息地を提供します。確かに、この地域で捕獲された砂のハエからの血の食事の研究では、昆虫のベクター、ノールまたはウサギ、およびその地域の人間との間の強い関連性が示されました。興味深いことに、免疫能のある患者（46〜60歳）で最大70％の症例が発見されています。この研究は、マドリードのこの地域で捕獲されたphlebotomus perniciosusからのL. infantum分離株のex vivo毒性を評価するように設計されました。 方法：マウスマクロファージと樹状細胞に、L。infantum株BCN150、BOS1FL1を分離する、または分離Pol2FL7にex in vivoに感染しました。感染後のさまざまな時期、感染指標、サイトカイン産生（IL-12p40およびIL-10）では、放出なしおよびアルギナーゼ活性が評価されました。 結果：マウス骨髄由来細胞における感染のex vivoモデルを使用して、分離株BOS1FL1およびPol2FL7による感染症が複数の方法で宿主免疫防御メカニズムを弱体化させることがわかりました。特定された主な要因は、INOSとアルギナーゼ活性のバランスとIL-12とIL-10の生成の間の平衡の両方の変化でした。分離株BOS1FL1およびPOL2FL7による感染は、BCN150株と比較してより高い感染率をもたらしました。24時間の感染指標値は次のとおりでした。BCN150感染細胞、感染したMøで110、感染したDCで115。BOS1FL1感染細胞、感染したMøで300、感染したDCで247。Pol2FL7感染細胞、感染したMøで275、感染したDCで292。 結論：我々のデータは、この固有の領域から捕捉されたL.幼児分離株が、内臓リーシュマニア症の病因に関与する感染指標、サイトカイン産生、および酵素活性の観点から高い毒性を示したことを示しています。全体として、これらのデータは、スペインのマドリードでのヒトリーシュマニア症の発生時にP. perniciosusから分離された寄生虫（BOS1FL1およびPOL2FL7）の病原性挙動の研究の出発点を提供し、感染免疫能の宿主に関与しています。

BACKGROUND: Since mid 2009, an outbreak of human leishmaniosis in Madrid, Spain, has involved more than 560 clinical cases. Many of the cases occurred in people who live in areas around a newly constructed green park (BosqueSur). This periurban park provides a suitable habitat for sand flies (the vectors of Leishmania infantum). Indeed, studies of blood meals from sand flies captured in the area showed a strong association between the insect vector, hares or rabbits, and humans in the area. Interestingly, up to 70% of cases have been found in immunocompetent patients (aged between 46-60 years). This study was designed to evaluate the ex vivo virulence of the L. infantum isolates from Phlebotomus perniciosus captured in this area of Madrid. METHODS: Murine macrophages and dendritic cells were infected ex vivo with L. infantum strain BCN150, isolate BOS1FL1, or isolate POL2FL7. At different times after infection, the infection indices, cytokine production (IL-12p40 and IL-10), NO release and arginase activities were evaluated. RESULTS: Using an ex vivo model of infection in murine bone marrow-derived cells, we found that infection with isolates BOS1FL1 and POL2FL7 undermined host immune defence mechanisms in multiple ways. The main factors identified were changes in both the balance of iNOS versus arginase activities and the equilibrium between the production of IL-12 and IL-10. Infection with isolates BOS1FL1 and POL2FL7 also resulted in higher infection rates compared to the BCN150 strain. Infection index values at 24 h were as follows: BCN150-infected cells, 110 for infected MØ and 115 for infected DC; BOS1FL1-infected cells, 300 for infected MØ and 247 for infected DC; and POL2FL7-infected cells, 275 for infected MØ and 292 for infected DC. CONCLUSIONS: Our data indicate that L. infantum isolates captured from this endemic area exhibited high virulence in terms of infection index, cytokine production and enzymatic activities involved in the pathogenesis of visceral leishmaniosis. Altogether, these data provide a starting point for the study of the virulence behaviour of parasites (BOS1FL1 and POL2FL7) isolated from P. perniciosus during the outbreak of human leishmaniosis in Madrid, Spain, and their involvement in infecting immunocompetent hosts.