安定した細胞標識に使用されるEGFPおよびDSRED2蛍光タンパク質の細胞毒性に対する抗生物質の影響の評価

蛍光マーカーの使用は、生物学的イメージングの魅力的なツールであることが証明されています。ただし、その有用性は、蛍光タンパク質の細胞毒性によって限定される場合があります。この記事では、培地に存在する抗生物質の影響を初めて調べました。EGFPおよびDSRED2マーカーの細胞標識に使用される抗生物質の影響を調べました。結果は、ドキシサイクリンがDSRED2発現肝腫細胞におけるアルブミン合成に悪影響を及ぼし、このタンパク質で標識された肝腫細胞とヒト皮膚線維芽細胞の両方が、成長率の低下によって特徴付けられることを示しました。したがって、蛍光マーカーの細胞毒性効果は、細胞標識に使用されるタンパク質と、細胞ストレスを引き起こす可能性のある成長条件に依存します。

The use of fluorescent markers has proven to be an attractive tool in biological imaging. However, its usefulness may be confined by the cytotoxicity of the fluorescent proteins. In this article, for the first time, we have examined an influence of the antibiotics present in culture medium on cytotoxicity of the EGFP and DsRed2 markers used for whole-cell labeling. Results showed that doxycycline negatively affected albumin synthesis in DsRed2-expressing hepatoma cells, and that both hepatoma cells and human skin fibroblasts, labeled with this protein, were characterized by the lowered growth rates. Thus, the cytotoxic effect of fluorescent markers depends on both protein used for cell labeling and on growth conditions that may cause cell stress.