ヒト歯髄線維芽細胞様細胞におけるMMP-3の炎症サイトカインTNF-α強化産生に対するJNK1/2の効果

AIM：ヒト歯髄線維芽細胞様細胞（HPFS）におけるマトリックスメタロプロテイナーゼ-3（MMP-3）の炎症サイトカイン腫瘍壊死因子α（TNF-α）強化された産生（HPFS）の炎症サイトカイン腫瘍壊死因子α（TNF-α）強化された産生に対するC-Jun N末端キナーゼ（JNK1/2）の効果を調査します（HPFS）。 方法論：HPFは、健康なドナーからのパルプ外植片から栽培されました。一次培養は、細胞を20〜30日間培養することにより確立されました。HPFSを使用した実験は、パッセージ3と10の間で実行されました。HPFは、TNF-αを含む血清フリー培地で24時間インキュベートしました。各ウェルの培地はSDSサンプルバッファーで調製され、ウエスタンブロッティングによってMMP-3について分析されました。 結果：JNK阻害剤SP601245は、TNF-α刺激されたヒトの歯髄線維芽細胞におけるMMP-3の産生を著しく阻害しました。MMP-3の生産は、HPFSのTNF-αによって強化されました。JNK1およびJNK2発現のサイレンシングは、この活性化を阻害しました。cAMP応答要素結合タンパク質（CREB）は、HPFSのTNF-αによって活性化されました。JNK1およびJNK2発現のサイレンシングは、この活性化を阻害しました。 結論：TNF-αの存在下でのJNK経路を介したCREBの活性化は、歯髄線維芽細胞におけるMMP-3産生の増強とともに発生しました。

AIM: To investigate the effects of the c-Jun N-terminal kinase (JNK1/2) on the inflammation cytokine tumour necrosis factor-alpha (TNF-α)-enhanced production of matrix metalloproteinase-3 (MMP-3) in human dental pulp fibroblast-like cells (HPFs). METHODOLOGY: HPFs were grown from pulp explants from healthy donors. Primary cultures were established by culturing the cells for 20 to 30 days. The experiments with HPFs were performed between passages 3 and 10. The HPFs were incubated in serum-free medium containing TNF-α for 24 h. The medium in each well was prepared in SDS sample buffer and was analysed for MMP-3 by Western blotting. RESULTS: JNK inhibitor SP601245 markedly inhibited the production of MMP-3 in TNF-α-stimulated human dental pulp fibroblasts. MMP-3 production was enhanced by TNF-α in HPFs; silencing JNK1 and JNK2 expression inhibited this activation. cAMP response element-binding protein (CREB) was activated by TNF-α in HPFs; silencing JNK1 and JNK2 expression inhibited this activation. CONCLUSION: The activation of CREB via JNK pathways in the presence of TNF-α occurred with enhancement of MMP-3 production in dental pulp fibroblasts.