ネコ肉腫ウイルスのTP1分離株は、ガンマアクチンシーケンスを欠いているFGR関連の癌遺伝子をコードします

新しいネコ肉腫ウイルス、TP1-FESVを分離しました。このウイルスは、チロシンキナーゼ活性を示す83 kDギャグonc融合タンパク質を縮小した微小留め型の83 kd gag-onc融合タンパク質をコードします。TP1-FESV関連ヘルパーウイルス（FELV）およびTP1-FESVトランスフェクトNIH細胞株を欠く非プロデューサー細胞株を確立しました。これらの細胞株から分離されたRNAのゲノムDNAおよびノー​​ザンブロット分析のサザンブロット分析により、TP1-FESV分離株の癌遺伝子はGR-FESVのFGR癌遺伝子に関連しているが、ガンマアクチンの相同性配列へのハイブリダイゼーションがないことが明らかになりました。GR-FESV。ゲノムライブラリからTP1-FESV固有のクローンを分離しました。制限酵素および配列分析により、TP1-FESVゲノムはGAG遺伝子の最初の1651ヌクレオチドで構成され、FGR配列が直接続くことが示されました。TP1-FESV FGRシーケンスは、GR-FESV FGR配列の開始後、43ヌクレオチドを開始します。C-FGRカルボキシ末端の13アミノ酸を失ったGR-FESV FGRとは対照的に、TP1-FESV FGRには、細胞FGR遺伝子の完全なカルボキシ末端が含まれています。TP1-FESV FGR配列の後に、未知の起源の一意の328ヌクレオチド長配列が続きます。3 '再結合部位は、ENVリーダーシーケンスの開始から460ヌクレオチド、Pol遺伝子内で発生します。TP1-FESVおよびGR-FESVの形質転換タンパク質の細胞内局在の比較は、顕著な違いを示しません。両方の分子は、部分的に細胞内膜/細胞骨格画分に関連しており、細胞PP90およびPP50とともに複合体を形成します。

We have isolated a new feline sarcoma virus, TP1-FeSV. The virus encodes a myristilated 83 kD gag-onc fusion protein displaying tyrosine kinase activity. We have established nonproducer cell lines lacking the TP1-FeSV associated helper virus (FeLV) and TP1-FeSV transfected NIH cell lines. Southern Blot analysis of genomic DNA and Northern Blot analysis of RNA isolated from these cell lines revealed that the oncogene of the TP1-FeSV isolate is related to the fgr oncogene of the GR-FeSV, but shows no hybridization to the gamma actin homologous sequences of the GR-FeSV. We have isolated TP1-FeSV specific clones from a genomic library. Restriction enzyme and sequence analysis showed that the TP1-FeSV genome consists of the first 1651 nucleotides of the gag gene, followed directly by fgr sequences. The TP1-FeSV fgr sequence starts 43 nucleotides after the beginning of the GR-FeSV fgr sequence. In contrast to the GR-FeSV fgr which has lost 13 amino acids of the c-fgr carboxy terminus, the TP1-FeSV fgr contains the complete carboxy terminus of the cellular fgr gene. The TP1-FeSV fgr sequence is followed by a unique 328 nucleotide long sequence of unknown origin. The 3' recombination site occurs within the pol gene, 460 nucleotides from the start of the env leader sequence. Comparison of the subcellular localization of the transforming proteins of TP1-FeSV and GR-FeSV show no striking difference; both molecules are in part associated with subcellular membrane/cytoskeletal fractions and form complexes with the cellular pp90 and pp50.