Notch2は、妊娠初期のヒト間質細胞の脱脱脱重において、プロラクチンとインスリン様成長因子結合タンパク質-1発現を制御します

脱落化、妊娠の子宮内膜へのヒト子宮粘膜の変換は、成功した着床と胚発生のために重要です。しかし、子宮間質細胞のホルモン分泌脱落細胞への分化を制御する重要な調節因子は完全には解明されていません。したがって、ここで、妊娠初期のサンプルから分離されたヒト脱落間間質細胞（HDSC）におけるノッチシグナル伝達経路の役割を調査しました。妊娠初期組織の免疫蛍光は、notch2受容体とその推定上の膜固定相互作用パートナーjagged1、delta様（dll）1およびdll4の発現を明らかにしました。エストロゲン/プロゲステロン（E2P4）および/または環状アデノシン一リン酸（cAMP）HDSCとのin vitro分化中に、それぞれ定量的PCR（QPCR）および西ブロッティングで測定されたJagged1 mRNAおよびタンパク質を弱く下方制御したJagged1 mRNAおよびタンパク質を構成的に発現させました。ただし、DLL1とDLL4のレベルの増加は、脱脱型培養で観察されました。Notch Luciferase ReporterとQPCRのトランスフェクションは、Split 1（HES1）の毛状およびエンハンサーのNotchターゲット遺伝子のQPCR（hes1）が、in vitro分化中の標準的なノッチ活性の誘導を明らかにしました。対照的に、HDSCの化学NOTCH/γ-セクレターゼ阻害剤での処理により、CAMP/E2P4刺激ノッチルシフェラーゼ活性、HES1転写レベル、および脱落膜マーカープロラクチン（PRL）およびインスリン様成長因子結合タンパク質1のmRNA発現が減少しました（IGFBP1）。同様に、siRNAを介した遺伝子サイレンシングまたはNotCH2の抗体媒介ブロッキングは、HES1、PRL、IGFBP1 mRNAレベルを低下させ、PRLタンパク質を分泌しました。要約すると、データは、標準的なNotch2依存性シグナル伝達が人間の脱落化において役割を果たすことを示唆しています。

Decidualization, the transformation of the human uterine mucosa into the endometrium of pregnancy, is critical for successful implantation and embryonic development. However, key regulatory factors controlling differentiation of uterine stromal cells into hormone-secreting decidual cells have not been fully elucidated. Hence, we herein investigated the role of the Notch signaling pathway in human decidual stromal cells (HDSC) isolated from early pregnancy samples. Immunofluorescence of first trimester decidual tissues revealed expression of Notch2 receptor and its putative, membrane-anchored interaction partners Jagged1, Delta-like (DLL) 1 and DLL4 in stromal cells whereas other Notch receptors and ligands were absent from these cells. During in vitro differentiation with estrogen/progesterone (E2P4) and/or cyclic adenosine monophosphate (cAMP) HDSC constitutively expressed Notch2 and weakly downregulated Jagged1 mRNA and protein, measured by quantitative PCR (qPCR) and Western blotting, respectively. However, increased levels of DLL1 and DLL4 were observed in the decidualizing cultures. Transfection of a Notch luciferase reporter and qPCR of the Notch target gene hairy and enhancer of split 1 (HES1) revealed an induction of canonical Notch activity during in vitro differentiation. In contrast, treatment of HDSC with a chemical Notch/γ-secretase inhibitor decreased cAMP/E2P4-stimulated Notch luciferase activity, HES1 transcript levels and mRNA expression of the decidual marker genes prolactin (PRL) and insulin-like growth factor binding protein 1 (IGFBP1). Similarly, siRNA-mediated gene silencing or antibody-mediated blocking of Notch2 diminished HES1, PRL and IGFBP1 mRNA levels as well as secreted PRL protein. In summary, the data suggest that canonical, Notch2-dependent signaling plays a role in human decidualization.