脂肪間質血管画分細胞の濃度依存性血管新生

脂肪由来間質血管画分（SVF）細胞は、in vitroおよびin vivo条件の両方で血管構造を形成するために自己結合することが示されています。SVF細胞集団の血管新生（既存の血管か​​らの新しい血管）および血管新生（自己組織化による新しい血管）の可能性は、直接治療するための細胞源（すなわち、さらなる細胞隔離なしのポイントのケア）虚血組織を提供する可能性があります。ただし、機能的な血管系を達成するために必要な脂肪SVF細胞の正しい投与量は確立されていません。したがって、in vitroおよびin vivoの用量応答アッセイは、SVF細胞の血管新生電位を評価して実行されました。新たに分離されたラット脂肪SVF細胞の連続希釈液を成長因子に播種し、マトリゲルの減少と血管新生が細胞管様ネットワークアセンブリとして評価され、3日間の培養後に定量化されました。このin vitro血管新生アッセイは、ラットSVF細胞が2.5×10（5）細胞/mLの濃度で最大ネットワーク長に達し、テストした高濃度で維持されたネットワークが維持されることを示しています。同じ濃度のラットおよびヒトSVF細胞を使用して、in vivoでの血管新生を評価しました。SVF細胞をコラーゲンゲルに組み込まれ、皮下でRAG1免疫不全マウスに移植しました。収穫されたコンストラクトの3D共焦点画像を評価して、SVF細胞血管新生の可能性の用量依存性を定量化しました。ラットおよびヒト由来のSVF細胞は、それぞれ1×10（6）および4×10（6）細胞/mlで最大血管新生電位をもたらしました。検査された濃度では、副作用（毒性、壊死、腫瘍形成など）は観察されませんでした。結論として、脂肪由来のSVF細胞集団の血管形成能は用量依存です。

Adipose-derived stromal vascular fraction (SVF) cells have been shown to self-associate to form vascular structures under both in vitro and in vivo conditions. The angiogenic (new vessels from existing vessels) and vasculogenic (new vessels through self-assembly) potential of the SVF cell population may provide a cell source for directly treating (i.e., point of care without further cell isolation) ischemic tissues. However the correct dosage of adipose SVF cells required to achieve a functional vasculature has not been established. Accordingly, in vitro and in vivo dose response assays were performed evaluating the SVF cell vasculogenic potential. Serial dilutions of freshly isolated rat adipose SVF cells were plated on growth factor reduced Matrigel and vasculogenesis, assessed as cellular tube-like network assembly, was quantified after 3 days of culture. This in vitro vasculogenesis assay indicated that rat SVF cells reached maximum network length at a concentration of 2.5 × 10(5) cells/ml and network maintained at the higher concentrations tested. The same concentrations of rat and human SVF cells were used to evaluate vasculogenesis in vivo. SVF cells were incorporated into collagen gels and subcutaneously implanted into Rag1 immunodeficient mice. The 3D confocal images of harvested constructs were evaluated to quantify dose dependency of SVF cell vasculogenesis potential. Rat- and human-derived SVF cells yielded a maximum vasculogenic potential at 1 × 10(6) and 4 × 10(6) cells/ml, respectively. No adverse reactions (e.g., toxicity, necrosis, tumor formation) were observed at any concentration tested. In conclusion, the vasculogenic potential of adipose-derived SVF cell populations is dose dependent.