ヒト乳がん由来のエストロゲン受容体への 2-ヒドロキシエストラジオールおよび 4-ヒドロキシエストラジオールの結合

カテコールエストロゲン、エポキシエノン、およびメトキシエストロゲンの結合は、ヒト​​乳がんから調製されたサイトゾル内のエストロゲン受容体を使用して評価されました。乳がん細胞によってインビトロでエストラジオール-17 ベータから形成される代謝産物である 2-ヒドロキシエストラジオールの相対親和性は、エストラジオール-17 ベータの相対親和性と区別できませんでした。4-ヒドロキシエストラジオールもエストラジオール-17 ベータの代謝産物であり、エストラジオール-17 ベータよりも約 1.5 倍大きい相対親和性でエストロゲン受容体と会合します。エポキシエノンおよびメトキシエストロゲンは、エストラジオール-17 ベータの結合と比較して弱い競合相手であり、エストラジオール-17 ベータの親和性の 3% 以下の相対親和性を示しました。スクロース密度勾配遠心分離により、2-ヒドロキシエストラジオールと4-ヒドロキシエストラジオールの両方が、エストロゲン受容体の4Sおよび8Sアイソフォームの両方に対するエストラジオール-17ベータの結合を競合的に阻害することが明らかになりました。2-ヒドロキシエストラジオールのKi = 0.94 nM、4-ヒドロキシエストラジオールのKi = 0.48 nMでした。これらのデータは、これらのカテコール エストロゲンの両方に対する特異的な受容体媒介エストロゲン作用を実証していると結論付けることができます。

The binding of catechol estrogens, epoxyenones and methoxyestrogens was evaluated using estrogen receptors in cytosol prepared from human breast cancers. The relative affinity of 2-hydroxyestradiol, a metabolite formed in vitro from estradiol-17 beta by breast cancer cells, was indistinguishable from that of estradiol-17 beta. 4-Hydroxyestradiol, which is also a metabolite of estradiol-17 beta, associated with the estrogen receptor with a relative affinity approximately 1.5-fold greater than that of estradiol-17 beta. Epoxyenones and methoxyestrogens were weak competitors compared to the binding of estradiol-17 beta, exhibiting relative affinities 3% or less than the affinity of estradiol-17 beta. Sucrose density gradient centrifugation revealed that both 2- and 4-hydroxyestradiol inhibited the binding of estradiol-17 beta to both the 4S and 8S isoforms of the estrogen receptor in a competitive manner, with a Ki = 0.94 nM for 2-hydroxyestradiol and a Ki = 0.48 nM for 4-hydroxyestradiol. It can be concluded that these data demonstrate a specific receptor-mediated estrogenic action for both of these catechol estrogens.