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Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)20150101Vol.1257issue()

凍結保存のための精子の浄化と遠心分離処理

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

人工授精を伴う出生率は、良質の精子サンプルで最も高くなります。したがって、生存不可の精子、細胞の破片、および精液が使用前または保存のために精液サンプルから除去されることが好ましい。このような化合物は、貯蔵中または凍結保存時に反応性酸素種が生成され、精子機能が損なわれる源です。この章では、精子サンプルから精液と細胞の破片を除去し、形態学的に正常な運動性精子を選択する方法について説明します。ここで説明する方法には、通常の遠心分離、精子スイムアップ、ガラスウールとセファデックスのろ過/順守、および単一層、および不連続な2層のヨディキサノール密度勾配遠心分離が含まれます。

人工授精を伴う出生率は、良質の精子サンプルで最も高くなります。したがって、生存不可の精子、細胞の破片、および精液が使用前または保存のために精液サンプルから除去されることが好ましい。このような化合物は、貯蔵中または凍結保存時に反応性酸素種が生成され、精子機能が損なわれる源です。この章では、精子サンプルから精液と細胞の破片を除去し、形態学的に正常な運動性精子を選択する方法について説明します。ここで説明する方法には、通常の遠心分離、精子スイムアップ、ガラスウールとセファデックスのろ過/順守、および単一層、および不連続な2層のヨディキサノール密度勾配遠心分離が含まれます。

Fertility rates with artificial insemination are highest with good-quality sperm samples. Therefore, nonviable sperm, cellular debris, and seminal plasma are preferably removed from semen samples prior to use or for preservation. Such compounds are sources where reactive oxygen species are generated during storage or upon cryopreservation, impairing sperm function. In this chapter we describe methods to remove seminal plasma and cellular debris from sperm samples, and for selecting morphologically normal motile sperm. The methods that are described here include: ordinary centrifugation, sperm swim-up, glass wool and Sephadex filtration/adherence, and single-layer as well as discontinuous two-layer iodixanol density gradient centrifugation.

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