Combretastatin（CA）-4およびその新規アナログCa-432は、Rho/Rockシグナル伝達経路を介したT細胞移動を損なう

T-リンパ球が組織に移動して局在する能力は、感染剤に対する保護機能において重要ですが、これらの細胞が腫瘍微小環境に浸透する能力は、癌の発症における主要な要因です。T細胞の移動には、リガンド（ICAM-1）/インテグリン（LFA-1）相互作用が必要であり、細胞内シグナル伝達経路を活性化し、アクチンが豊富なラメリポジウムと微小管（MT）-rich uropodを備えた明確な偏光形態を引き起こします。Combretastatin（CA）-4は、強力な抗腫瘍特性を持つMT想定剤です。この研究では、CA-4とその新規アナログCA-432がヒトT細胞移動に及ぼす影響を評価しました。CA化合物のいずれかを含む細胞前処理は、T細胞系統HUT-78および一次末梢血リンパ球（PBL）T細胞の移動と走化性を阻害しました。CA化合物のこの移動抑制効果は、チューブリンの脱解重合、チューブリンのアセチル化の減少、およびMT安定性の低下を介したT細胞のMTネットワークの破壊によるものでした。さらに、両方のCa化合物がRhoA/RhoA関連キナーゼ（ROCK）シグナル伝達経路を誘導し、ミオシン軽鎖（MLC）のリン酸化をもたらしました。さらに、T細胞でMTSから放出されるとRhoAを活性化するMT関連ヌクレオチド交換因子であるGef-H1のsiRNA媒介枯渇は、MLCのCa誘発性リン酸化を防ぎ、アクチンが豊富な膜突起および細胞収縮性の形成を減衰させました。これらの結果は、T細胞のCa誘導収縮性の媒介におけるGEF-H1/RHOA/ROCK/MLCシグナル伝達軸の重要な役割を示唆しています。細胞骨格タンパク質を標的とし、細胞遊走を阻害するのに効果的な治療剤は、癌と転移の治療に新しい道を開く可能性があります。

The capacity of T-lymphocytes to migrate and localise in tissues is important in their protective function against infectious agents, however, the ability of these cells to infiltrate the tumour microenvironment is a major contributing factor in the development of cancer. T-cell migration requires ligand (ICAM-1)/integrin (LFA-1) interaction, activating intracellular signalling pathways which result in a distinct polarised morphology, with an actin-rich lamellipodium and microtubule (MT)-rich uropod. Combretastatin (CA)-4 is a MT-destabilising agent that possesses potent anti-tumour properties. In this study, the effect of CA-4 and its novel analogue CA-432 on human T-cell migration was assessed. Cellular pretreatment with either of CA compounds inhibited the migration and chemotaxis of the T-cell line HuT-78 and primary peripheral blood lymphocyte (PBL) T-cells. This migration-inhibitory effect of CA compounds was due to the disruption of the MT network of T-cells through tubulin depolymerisation, reduced tubulin acetylation and decreased MT stability. In addition, both CA compounds induced the RhoA/RhoA associated kinase (ROCK) signalling pathway, leading to the phosphorylation of myosin light chain (MLC). Furthermore, the siRNA-mediated depletion of GEF-H1, a MT-associated nucleotide exchange factor that activates RhoA upon release from MTs, in T-cells prevented CA-induced phosphorylation of MLC and attenuated the formation of actin-rich membrane protrusions and cell contractility. These results suggest an important role for a GEF-H1/RhoA/ROCK/MLC signalling axis in mediating CA-induced contractility of T-cells. Therapeutic agents that target cytoskeletal proteins and are effective in inhibiting cell migration may open new avenues in the treatment of cancer and metastasis.