MicroRNA-495は、ケモカインCCL2を標的とすることにより、ヒト臍静脈内皮細胞の増殖とアポトーシスを調節します

はじめに：内皮機能障害は、アテローム性動脈硬化症において重要な役割を果たします。マイクロRNAは、標的遺伝子の3 '非翻訳領域に結合することにより遺伝子発現を抑制する内因性の非コードRNAです。miR-495は、癌細胞の増殖とアポトーシスを調節することができますが、内皮細胞（EC）におけるmiR-495の役割は不明のままです。したがって、この研究の目的は、ECSの増殖とアポトーシスに関するmiR-495の役割とメカニズムを調査することです。 材料と方法：miR-495およびCCL2式は、定量的RT-PCR、ELISAアッセイ、ウエスタンブロットを使用して調べました。バイオインフォマティクス分析とルシフェラーゼレポーターアッセイを使用して、miR-495とCCL2の調節関係を調べました。CCK8アッセイ、BRDU取り込みアッセイ、およびフローサイトメトリーを使用して、ヒト臍静脈内皮細胞（HUVEC）の増殖におけるmiR-495およびCCL2の役割を分析しました。Huvecsアポトーシスに対するmiR-495およびCCL2の効果は、トンネル染色とウエスタンブロットによって調べられました。 結果：miR-495は、健康なコントロールと比較して冠動脈疾患患者でダウンレギュレートされました。CCL2はmiR-495の新規標的遺伝子でした。miR-495は、細胞周期分布を変化させることによりHUVECSの増殖を著しく促進し、切断されたカスパーゼ3の発現に影響を与えることによりHUVECSアポトーシスを阻害しました。HUVECSの増殖とアポトーシスに対するMIR-495の効果は、CCLCL2の過剰発現によって有意に回復しました。 結論：miR-495は、CCL2を直接標的とすることにより、HUVECの増殖とアポトーシスに影響を与える可能性があります。これは、Huvecsの増殖とアポトーシスに対するmiR-495の役割とメカニズムを開示する最初のレポートであり、アテローム性動脈硬化症のメカニズムを明確にするための理論的根拠を提供する可能性があります。

INTRODUCTION: Endothelium dysfunction plays a critical role in atherosclerosis. MicroRNAs are endogenous non-coding RNAs that suppress gene expression by binding to the 3' untranslated regions of target genes. MiR-495 can regulate the proliferation and apoptosis of cancer cells, however, the roles of miR-495 in endothelial cells (ECs) remain unclear. Therefore, this study aims to investigate the roles and mechanisms of miR-495 on ECs proliferation and apoptosis. MATERIALS AND METHODS: MiR-495 and CCL2 expressions were examined using quantitative RT-PCR, ELISA assay and western blot. Bioinformatics analysis and luciferase reporter assay were used to examine the regulatory relationship between miR-495 and CCL2. CCK8 assay, BrdU incorporation assay and flow cytometry were used to analyze the roles of miR-495 and CCL2 on the proliferation of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). The effects of miR-495 and CCL2 on HUVECs apoptosis were examined by tunnel staining and western blot. RESULTS: MiR-495 was down-regulated in patients with coronary artery disease compared with healthy controls. CCL2 was a novel target gene of miR-495. MiR-495 significantly promoted HUVECs proliferation by altering cell cycle distribution, and it also inhibited HUVECs apoptosis by affecting the expression of cleaved caspase 3. Effects of miR-495 on HUVECs proliferation and apoptosis were significantly reversed by overexpression of CCL2. CONCLUSIONS: MiR-495 could affect HUVECs proliferation and apoptosis by directly targeting CCL2. This is the first report to disclose the roles and mechanisms of miR-495 on HUVECs proliferation and apoptosis, which may provide a theoretical basis for clarifying the mechanisms of atherosclerosis.