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International journal of hematology2015Feb01Vol.101issue(2)

低レベルのVon Willebrand因子Ristocetin補因子活性を測定するための自動化されたCS-2000I™方法の最適化(VWF:RCO)

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

Von Willebrand因子の測定Ristocetin補因子活性(VWF:RCO)は、Von Willebrand病(VWD)の診断に必要です。ただし、従来のマニュアルガラスプレート法は技術的に要求が厳しく、高い/labまたは軽labory間変動を示します。特定のVWF:RCO試薬を使用してCS-2000I™を利用して自動化された手法が最近説明されましたが、低レベル(<10 IU/DL)での測定には信頼性がありません。この自動化されたシステムを最適化して、低レベルのVWF:RCOを測定しました。サンプル量(72μL)と初期攪拌速度(400 rpm)を使用して、CV <20%で検出されたRCOの最低レベルは2.5 IU/dLでした。この攪拌速度では、サンプル量が少ないこの攪拌速度では、より大きなばらつきが明らかでした。ただし、サンプル量(72μL)で攪拌速度(200 rpm)を減少させましたが、CVを大幅に改善し、最低レベル(≤2.5IU/DL)で有効にしました。最適化されたアッセイは、10 IU/DL VWF <10 IU/DL VWF:RCOのガラス板法との高い相関(R(2)= 0.841)を示し、異なるVWF:RCO試薬が結果に影響しなかったことを示唆しています。さらに、VWF:RCO後のDDAVP注入の変化は両方のアッセイで並行しており、自動化された方法がVWDの治療の臨床モニタリングに適していることを示しています。VWF:RCOの最適化された自動測定は、低レベルの止血活動でVWFを評価するための有望な方法を提供します。

Von Willebrand因子の測定Ristocetin補因子活性(VWF:RCO)は、Von Willebrand病(VWD)の診断に必要です。ただし、従来のマニュアルガラスプレート法は技術的に要求が厳しく、高い/labまたは軽labory間変動を示します。特定のVWF:RCO試薬を使用してCS-2000I™を利用して自動化された手法が最近説明されましたが、低レベル(<10 IU/DL)での測定には信頼性がありません。この自動化されたシステムを最適化して、低レベルのVWF:RCOを測定しました。サンプル量(72μL)と初期攪拌速度(400 rpm)を使用して、CV <20%で検出されたRCOの最低レベルは2.5 IU/dLでした。この攪拌速度では、サンプル量が少ないこの攪拌速度では、より大きなばらつきが明らかでした。ただし、サンプル量(72μL)で攪拌速度(200 rpm)を減少させましたが、CVを大幅に改善し、最低レベル(≤2.5IU/DL)で有効にしました。最適化されたアッセイは、10 IU/DL VWF <10 IU/DL VWF:RCOのガラス板法との高い相関(R(2)= 0.841)を示し、異なるVWF:RCO試薬が結果に影響しなかったことを示唆しています。さらに、VWF:RCO後のDDAVP注入の変化は両方のアッセイで並行しており、自動化された方法がVWDの治療の臨床モニタリングに適していることを示しています。VWF:RCOの最適化された自動測定は、低レベルの止血活動でVWFを評価するための有望な方法を提供します。

Measurements of von Willebrand factor ristocetin cofactor activity (VWF:RCo) are necessary for the diagnosis of von Willebrand disease (VWD). However, the conventional manual glass-plate method is technically demanding, and exhibits high intra-/inter-laboratory variation. An automated technique has been recently described utilizing the CS-2000i™ with specific VWF:RCo reagents, but measurements at lower levels (<10 IU/dL) lack reliability. We have optimized this automated system for measuring low levels of VWF:RCo. Using a sample volume (72 μL) and initial stirring speed (400 rpm), the lowest level of VWF:RCo detected with a CV < 20 % was 2.5 IU/dL. Greater variability was evident at this stirring speed with smaller sample volumes. Decreasing the stirring speed (200 rpm) with a sample volume (72 μL), however, significantly improved the CV, and enabled measurements at the lowest levels (≤2.5 IU/dL). The optimized assay demonstrated a high correlation (R(2) = 0.841) with the glass-plate method at <10 IU/dL VWF:RCo, suggesting that the different VWF:RCo reagents did not affect the results. In addition, changes in VWF:RCo post-DDAVP infusions were parallel in both assays, indicating that the automated method is suitable for the clinical monitoring of treatment in VWD. The optimized automated measurement of VWF:RCo offers a promising method for evaluating VWF at low levels of hemostatic activity.

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