新規のフラボンテトラメトキシルテオリンは、ヒトマスト細胞の強力な阻害剤です

背景：マスト細胞（MC）は、組織で成熟し、複数のメディエーターを分泌することによりアレルギー、免疫、炎症に関与する造血細胞です。天然フラボンルテオリンには抗炎症作用があり、ヒトマスト細胞（MC）を阻害します。 目的：ルテオリンとその新規構造アナログ3 '、4'、5,7-テトラメトキシルテオリン（Methlut）の能力を調査して、ヒトMCメディエーターの発現を阻害し、in vitroおよびin vivoで放出しました。 方法：ヒトLAD2細胞および臍の原発性ヒト臍帯血由来培養マスト細胞は、ルテオリン、メタルート、またはクロモリン（1-100μmol/L）を含むプレインキュベーションの有無にかかわらず、物質P（SP）またはIgE/抗IGEで刺激されました。2時間または24時間後、メディエーター分泌を測定しました。化合物がMC細胞内カルシウムレベルと核因子κB活性化に及ぼす影響も調査されました。Methlutによる前処理は、ジニトロフェノールヒト血清アルブミンで受動的に感作されたマウスでも研究され、皮内で挑戦しました。 結果：Methlutは、SPまたはIgE/抗IGEのいずれかによって刺激されたLAD2細胞からのβ-ヘキソサミニダーゼおよびヒスタミン分泌のルテオリンまたはクロモリンよりも強力な阻害剤ですが、メタルートとルテオリンのみが事前に形成されたTNF分泌を有意に阻害します。Methlutはまた、LAD2細胞からのde Novo-合成されたTNFおよびヒト臍帯血由来の培養MCからのCCL2のルテオリンよりも強力な阻害剤です。このMethlutの作用メカニズムは、細胞の生存率に影響を与えることなくSPによって刺激されたLAD2細胞の転写および翻訳レベルの両方で、核因子κB誘導だけでなく、細胞内カルシウムレベルの増加を阻害する能力によるものかもしれません。Methlutによる腹腔内治療は、ジニトロフェノールヒューマン血清アルブミンに受動的に感作され、皮内に挑戦したマウスのエヴァンスブルー色素の皮膚血管透過性を有意に低下させます。 結論：Methlutは、アレルギーおよび炎症状態の治療のための有望なMC阻害剤です。

BACKGROUND: Mast cells (MCs) are hematopoietic cells that mature in tissues and are involved in allergy, immunity, and inflammation by secreting multiple mediators. The natural flavone luteolin has anti-inflammatory actions and inhibits human mast cells (MCs). OBJECTIVE: We sought to investigate the ability of luteolin and its novel structural analog 3',4',5,7-tetramethoxyluteolin (methlut) to inhibit human MC mediator expression and release in vitro and in vivo. METHODS: Human LAD2 cells and umbilical primary human cord blood-derived cultured mast cells were stimulated with substance P (SP) or IgE/anti-IgE with or without preincubation with luteolin, methlut, or cromolyn (1-100 μmol/L) for 2 or 24 hours, after which mediator secretion was measured. The effect of the compounds on MC intracellular calcium levels and nuclear factor κB activation was also investigated. Pretreatment with methlut was also studied in mice passively sensitized with dinitrophenol-human serum albumin and challenged intradermally. RESULTS: Methlut is a more potent inhibitor than luteolin or cromolyn for β-hexosaminidase and histamine secretion from LAD2 cells stimulated by either SP or IgE/anti-IgE, but only methlut and luteolin significantly inhibit preformed TNF secretion. Methlut is also a more potent inhibitor than luteolin of de novo-synthesized TNF from LAD2 cells and of CCL2 from human cord blood-derived cultured MCs. This mechanism of action for methlut might be due to its ability to inhibit intracellular calcium level increases, as well as nuclear factor κB induction, at both the transcriptional and translational levels in LAD2 cells stimulated by SP without affecting cell viability. Intraperitoneal treatment with methlut significantly decreases skin vascular permeability of Evans blue dye in mice passively sensitized to dinitrophenol-human serum albumin and challenged intradermally. CONCLUSION: Methlut is a promising MC inhibitor for the treatment of allergic and inflammatory conditions.