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Annals of transplantation2014Dec15Vol.19issue()

比較的高いレベルの抗HLA抗体(ルミネックス単一抗原ビードアッセイで測定)は、同種免疫腎患者から血清によって誘導されるリンパ球増殖の阻害を媒介するために必要です。

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文献タイプ:
  • Evaluation Study
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

背景:移植臓器の拒絶は、主にHLA分子に対する同種免疫反応によって引き起こされます。抗ドナーHLA抗体は、抗体媒介拒絶(AMR)および移植片の転帰不良に関連しています。これらの抗体の検出に臨床的に関心があるため、検出の感度を高めるために新しい技術が最近導入されました。Luminexシングルアンチゲン(LSA)ビードアッセイは新しい情報を生成する可能性がありますが、生物学的および臨床データに対して検証する必要があります。 材料と方法:リンパ球に対する抗HLA抗体のin vitro効果に関する以前に公開されたデータに基づいて、抗HLA抗体の力価が高い移植待機リストに対する患者の血清のリンパ球に対する効果を測定しました。抗CD3を介したリンパ球の活性化は、これらの患者からの血清全体の存在下で研究されました。カルボキシフルオレセインサッチニミジルエステル(CFSE)標識によって測定されたリンパ球増殖の変化が検出され、これらの変化は抗HLA抗体のレベルと相関していました。 結果:抗HLA抗体を含む全体の血清は、リンパ球増殖を阻害しました。この効果は、LSAで測定されるように、抗体のレベルと相関していました。吸着実験で示されるように、この阻害効果はHLA特異的でした。また、リンパ球増殖のin vitroモデルの変化を誘発するためには、比較的高いレベルの抗HLA抗体が必要であることがわかりました。 結論:我々の結果は、LSAによる抗HLA抗体を検出する臨床的有用性を示しています。

背景:移植臓器の拒絶は、主にHLA分子に対する同種免疫反応によって引き起こされます。抗ドナーHLA抗体は、抗体媒介拒絶(AMR)および移植片の転帰不良に関連しています。これらの抗体の検出に臨床的に関心があるため、検出の感度を高めるために新しい技術が最近導入されました。Luminexシングルアンチゲン(LSA)ビードアッセイは新しい情報を生成する可能性がありますが、生物学的および臨床データに対して検証する必要があります。 材料と方法:リンパ球に対する抗HLA抗体のin vitro効果に関する以前に公開されたデータに基づいて、抗HLA抗体の力価が高い移植待機リストに対する患者の血清のリンパ球に対する効果を測定しました。抗CD3を介したリンパ球の活性化は、これらの患者からの血清全体の存在下で研究されました。カルボキシフルオレセインサッチニミジルエステル(CFSE)標識によって測定されたリンパ球増殖の変化が検出され、これらの変化は抗HLA抗体のレベルと相関していました。 結果:抗HLA抗体を含む全体の血清は、リンパ球増殖を阻害しました。この効果は、LSAで測定されるように、抗体のレベルと相関していました。吸着実験で示されるように、この阻害効果はHLA特異的でした。また、リンパ球増殖のin vitroモデルの変化を誘発するためには、比較的高いレベルの抗HLA抗体が必要であることがわかりました。 結論:我々の結果は、LSAによる抗HLA抗体を検出する臨床的有用性を示しています。

BACKGROUND: Rejection of transplanted organs is caused by alloimmune responses, primarily against HLA molecules. Anti-donor HLA antibodies are associated with antibody-mediated rejection (AMR) and poor graft outcome. Because of clinical interest in detecting these antibodies, new technologies have recently been introduced to increase the sensitivity of detection. The Luminex Single-Antigen (LSA) bead assay may yield new information, but it must be validated against biological and clinical data. MATERIAL AND METHODS: Based on previously published data regarding the in vitro effects of anti-HLA antibodies on lymphocytes, we measured the effect on lymphocytes of sera from patients on the transplant waiting list who had high titers of anti-HLA antibodies. Anti-CD3-mediated lymphocyte activation was studied in the presence of whole serum from these patients. Changes in lymphocyte proliferation, measured by carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) labeling, were detected, and these changes correlated with the level of anti-HLA antibodies. RESULTS: Whole serum containing anti-HLA antibodies inhibited lymphocyte proliferation; this effect correlated with the level of antibodies, as measured by LSA. This inhibitory effect was HLA-specific, as shown by adsorption experiments. We also found that relatively high levels of anti-HLA antibodies were necessary to induce changes in an in vitro model of lymphocyte proliferation. CONCLUSIONS: Our results demonstrate the clinical utility of detecting anti-HLA antibodies by LSA.

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