in vivo技術を使用したラット大脳における新規イノシトール脂質、ホスファチジルイノシトール三症（PIP3）の同定

ラットは、[3H] - メオイノシトールの20 UCIの脳室内注射を受け、24時間後に高出力の頭部中心のマイクロ波固定により犠牲にされました。2つのイノシトール脂質抽出方法が比較されました。ハウザーとアイヒバーグ法は、イノシトール脂質の回復が高くなりましたが、イノシトールリン酸含有量が低くなりました。Schacht法により、脂質画分の放射標識の減少が得られましたが、水溶性リン酸塩の増加が増加しました。どちらの方法でも、イノシトールテトラキスリン酸（IP4）を極ヘッドグループとして含む新規イノシトール脂質（PIP3）を抽出しました。これは、アルカリ加水分解によって決定され、本物のIP4標準を備えた高性能液体クロマトグラフィーによって分析されました。さらに、脂肪酸組成の予備研究では、他のイノシトール脂質との類似性が示されました。PIP2：PIP3の放射標識比は5：1でした。要約すると、イノシトール四リン酸（IP4）の親化合物であるラット脳、PIP3の新規イノシトールリン脂質を分離しました。

Rats received intraventricular injections of 20 uCi of [3H]-myo-inositol, and were sacrificed 24 hrs later by high-power head-focused microwave fixation. Two inositol lipid extraction methods were compared: The Hauser and Eichberg method yielded higher recovery of inositol lipids, but a lower inositol phosphate content. The Schacht method yielded reduced radiolabel in the lipid fractions, but increased water soluble phosphates. Both methods extracted a novel inositol lipid (PIP3) which contained inositol tetrakisphosphate (IP4) as its polar head group. This was determined by alkaline hydrolysis and analyzed by high performance liquid chromatography with authentic IP4 standard. Furthermore, preliminary studies of the fatty acid composition indicated a similarity with other inositol lipids. The radiolabel ratio of PIP2:PIP3 was 5:1. In summary, we have isolated a novel inositol phospholipid in rat brain, PIP3, the parent compound for inositol tetrakisphosphate (IP4).