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Nanoscale2015Mar07Vol.7issue(9)

生細胞におけるマルチモーダルアポトーシスモニタリングのためのアネキシン-V/量子ドットプローブ:電気化学を使用した生物分析の改善

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

アポトーシスの有用かつ完全な監視を可能にする新しい技術を開発するという大きな需要があります。これは、いくつかの疾患の重要な要因であり、医薬品開発の標的です。ここでは、アポトーシスの検出と研究のために、新しいデュアル電気化学/光学ラベルの使用を提示します。アポトーシス細胞の外膜で発現するリン脂質であるホスファチジルセリンのアネキシン-Vの特異性を、量子ドットの光学的および電気化学的特性と、より効率的な標識を作成しました。このコンジュゲートを使用して、3つの重要な問題に対処しました。(i)アポトーシス細胞の標識をより速く(30分)より簡単にしました。(ii)一般的な細胞生物学的技術(共焦点レーザー走査顕微鏡、走査型電子顕微鏡、フローサイトメトリー)によってサンプルを完全に特徴付けました。(iii)アポトーシス細胞の高速で安価で定量的な電気化学検出方法を開発し、フローサイトメトリーによって得られたものと完全に一致する結果を得ました。

アポトーシスの有用かつ完全な監視を可能にする新しい技術を開発するという大きな需要があります。これは、いくつかの疾患の重要な要因であり、医薬品開発の標的です。ここでは、アポトーシスの検出と研究のために、新しいデュアル電気化学/光学ラベルの使用を提示します。アポトーシス細胞の外膜で発現するリン脂質であるホスファチジルセリンのアネキシン-Vの特異性を、量子ドットの光学的および電気化学的特性と、より効率的な標識を作成しました。このコンジュゲートを使用して、3つの重要な問題に対処しました。(i)アポトーシス細胞の標識をより速く(30分)より簡単にしました。(ii)一般的な細胞生物学的技術(共焦点レーザー走査顕微鏡、走査型電子顕微鏡、フローサイトメトリー)によってサンプルを完全に特徴付けました。(iii)アポトーシス細胞の高速で安価で定量的な電気化学検出方法を開発し、フローサイトメトリーによって得られたものと完全に一致する結果を得ました。

There is a great demand to develop novel techniques that allow useful and complete monitoring of apoptosis, which is a key factor of several diseases and a target for drug development. Here, we present the use of a novel dual electrochemical/optical label for the detection and study of apoptosis. We combined the specificity of Annexin-V for phosphatidylserine, a phospholipid expressed in the outer membrane of apoptotic cells, with the optical and electrochemical properties of quantum dots to create a more efficient label. Using this conjugate we addressed three important issues: (i) we made the labeling of apoptotic cells faster (30 min) and easier; (ii) we fully characterized the samples by common cell biological techniques (confocal laser scanning microscopy, scanning electron microscopy and flow cytometry); and (iii) we developed a fast, cheap and quantitative electrochemical detection method for apoptotic cells with results in full agreement with those obtained by flow cytometry.

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