アフリカツメガエル卵抽出物におけるO6-メチルグアニン含有DNAの不一致修復依存代謝

N-メチル-N'-ニトロソーレア（MNU）、N-メチル-N'-ニトロ-N-ニトロソグアニジン（MNNG）、または癌化学療法療法療法療法療法療法療法療法剤、ダカルバジン、ストレプトゾトシンなどのSN1型アルキル化剤の細胞毒性は、ゲノムDNAにおけるO（6） - メチルグアニン（（ME）G）の持続性。1つの仮説では、（ME）G毒性は、複製中に発生する（ME）G/Cまたは（ME）G/T誤差を処理するための不一致修復（MMR）システムの無駄な試みによって引き起こされると仮定していますが、代替提案は後者が示唆しています病変は、DNA損傷シグナル伝達、細胞周期停止、アポトーシスを直接活性化します。in vivoでの（ME）G誘発細胞の殺害の分子メカニズムを解明しようとする試みは、上記の試薬が異なる修復経路によって処理されるゲノムDNAのいくつかのタイプの修飾を誘導するという事実によって妨げられています。対照的に、in vitroで研究された定義された基質は複製を受けませんでした。単一の（ME）G残基、またはメチル化精子クロマチンを含むファゲミド基質のいずれかを使用して、複製能力のあるアフリカ型のアフリカ型のアフェノパスレビス卵抽出物のこの現象を再検討することに着手しました。私たちの調査結果は、無駄なサイクリング仮説をさらにサポートしています。

The cytotoxicity of SN1-type alkylating agents such as N-methyl-N'-nitrosourea (MNU), N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG), or the cancer chemotherapeutics temozolomide, dacarbazine and streptozotocin has been ascribed to the persistence of O(6)-methylguanine ((me)G) in genomic DNA. One hypothesis posits that (me)G toxicity is caused by futile attempts of the mismatch repair (MMR) system to process (me)G/C or (me)G/T mispairs arising during replication, while an alternative proposal suggests that the latter lesions activate DNA damage signaling, cell cycle arrest and apoptosis directly. Attempts to elucidate the molecular mechanism of (me)G-induced cell killing in vivo have been hampered by the fact that the above reagents induce several types of modifications in genomic DNA, which are processed by different repair pathways. In contrast, defined substrates studied in vitro did not undergo replication. We set out to re-examine this phenomenon in replication-competent Xenopus laevis egg extracts, using either phagemid substrates containing a single (me)G residue, or methylated sperm chromatin. Our findings provide further support for the futile cycling hypothesis.