カテーテル関連の感染症から分離された幅広いバイオフィルム形成臨床株に対するロック療法として、エドタまたはL-アルギニンと組み合わせたゲンタマイシン、バンコマイシンまたはアミカシンのin vitro活性

目的：カテーテル関連の血流感染症（CRBSI）の治療は、抗生物質に対する細菌バイオフィルムの特徴的な耐性によって妨げられます。私たちの目的は、抗生物質とアルカリアミノ酸L-アルギニンまたは陽イオンキレーターEDTAの効果を研究し、CRBSIに関与する臨床株の配列によって形成されたin vitroバイオフィルムの細菌殺害と、疫学的に関連する細菌種の代表者によって形成された臨床株の配列によって形成されます。。 方法：以前の臨床研究で説明されている32の株のうち、私たちは、短所（n = 4）、黄色ブドウ球菌（n = 4）、腸球菌（n = 2）、pseudomonas aeruginosaを含む最も抗生物質耐性株に焦点を当てました。4）および腸内菌（n = 4）。in vitroバイオフィルムモデル（96ウェルプレートアッセイ）を使用して、バイオフィルム耐性を研究し、抗生物質と非抗生物質アジュバントのさまざまな組み合わせをテストしました。ゲンタマイシン、アミカシン、またはバンコマイシンをDisodium EDTAまたはL-アルギニンと24時間組み合わせて、抗生物質ロック療法（ALT）アプローチを再現しました。バイオフィルム細菌の殺害は、井戸の表面からすべてのバイオフィルム細菌を分離するために、上下にピペッティングする激しいステップの後、CFUの定量化によって測定されました。 結果：両方の補助戦略は、グラム陽性およびグラム陰性の細菌病原体によって形成されたバイオフィルムに対する抗生物質の効果を大幅に増加させました。ゲンタマイシン+EDTAの組み合わせは、1つの緑膿菌とは別に、すべての試験株に対して活性でした。ゲンタマイシン+L-アルギニンの組み合わせは、テストされた株のほとんどに対して活性化され、増強が観察されなかった短所の顕著な例外を除きました。また、アミカシン+EDTAはグラム陰性菌に対して活性があり、バンコマイシン+EDTAがグラム陽性菌に対して活性であることを実証しました。 結論：EDTAの添加により、CRBSIの原因となる幅広い細菌株によって形成されたバイオフィルムに対するゲンタマイシン、アミカシン、バンコマイシンの活性が向上しました。

OBJECTIVES: Treatment of catheter-related bloodstream infections (CRBSI) is hampered by the characteristic tolerance of bacterial biofilms towards antibiotics. Our objective was to study the effect of the combination of antibiotics and the alkaline amino acid l-arginine or the cation chelator EDTA on the bacterial killing of in vitro biofilms formed by an array of clinical strains responsible for CRBSI and representative of epidemiologically relevant bacterial species. METHODS: Among 32 strains described in a previous clinical study, we focused on the most antibiotic-tolerant strains including CoNS (n = 4), Staphylococcus aureus (n = 4), Enterococcus faecalis (n = 2), Pseudomonas aeruginosa (n = 4) and Enterobacteriaceae (n = 4). We used an in vitro biofilm model (96-well plate assay) to study biofilm tolerance and tested various combinations of antibiotics and non-antibiotic adjuvants. Gentamicin, amikacin or vancomycin was combined with disodium EDTA or l-arginine for 24 h to reproduce the antibiotic lock therapy (ALT) approach. Killing of biofilm bacteria was measured by cfu quantification after a vigorous step of pipetting up and down in order to detach all biofilm bacteria from the surface of the wells. RESULTS: Both of our adjuvant strategies significantly increased the effect of antibiotics against biofilms formed by Gram-positive and Gram-negative bacterial pathogens. The combination of gentamicin + EDTA was active against all tested strains apart from one P. aeruginosa. The combination of gentamicin + l-arginine was active against most of the tested strains with the notable exception of CoNS for which no potentiation was observed. We also demonstrated that amikacin + EDTA was active against Gram-negative bacteria and that vancomycin + EDTA was active against Gram-positive bacteria. CONCLUSIONS: The addition of EDTA enhanced the activity of gentamicin, amikacin and vancomycin against biofilms formed by a wide spectrum of bacterial strains responsible for CRBSI.