Hoechst 33258の集合機能と蛍光

溶液中のビスベンジミドHoechst 33258の機能は、DNAの定量化において主に活用されています。その行動を理解することは、その広範な応用と生物学的プロセスの学習を促進するために不可欠です。蛍光青色染料Hoechst 33258の二量体化プロセスの詳細な研究は、等温滴定熱量測定、吸光度、蛍光、微分走査熱量測定、およびTジャンプ速度測定によって行われます。二量体/モノマー比は、色素濃度とイオン強度に依存します。生理学的条件（pH = 7.0; i = 0.10 m）、kd = 3×10（4）m（-1）で決定される二量体化定数は、染料のミクロモル濃度のみが合理的に大量のモノマー種を確保できることを伝えます。解決。たとえば、10μM色素含有量の場合、ダイマーはI> 0.08 mで普及しますが、モノマーは低イオン強度で観察されます。これは、ダイマー種がモノマーや蛍光強度よりも蛍光である限り解明される重要な問題です。イオン強度と染料濃度に強く依存しています。

The functionality of the bisbenzimide Hoechst 33258 in solution has been largely exploited in the quantification of DNA. Understanding of its behavior is essential to promote its widespread application and learning of biological processes. A detailed study of the dimerization process of the fluorescent blue dye Hoechst 33258 is carried out by isothermal titration calorimetry, absorbance, fluorescence, differential scanning calorimetry and T-jump kinetic measurements. The dimer/monomer ratio depends on the dye concentration and the ionic strength. The dimerization constant determined under physiological conditions (pH = 7.0; I = 0.10 M), KD = 3 × 10(4) M(-1), conveys that only micromolar concentrations of the dye can ensure reasonably high amounts of the monomer species in solution. For instance, for 10 μM dye content, the dimer prevails for I > 0.08 M, whereas the monomer is observed at low ionic strength, a key issue to be elucidated as long as the dimer species is more fluorescent than the monomer and the fluorescence intensity strongly relies on the ionic strength and the dye concentration.