Calf-Thymus DNAポリメラーゼα画分に見られる68-S DNAポリメラーゼ活性の精製と特性に関する研究

子牛胸腺DNAポリメラーゼアルファの不均一性がさらに調査されています。特に、ポリ（DA）でより高い活性を示す酵素（酵素D）。（DT）10（A：T = 20：1）活性化DNAのそれと比較して、さらに精製され、その特性はDNAポリメラーゼα画分（酵素A1およびC）の他の2つの活性と比較して、Aを示していません。ポリ（DA）の好み。（dt）10活性化DNA上。A1およびCと同様に、酵素Dは、DEAEセルロースへの結合によって判断される酸性タンパク質であるという点で、DNAポリメラーゼアルファの多くの特性特性を持っていることが示されました。ポリ（a）。（dt）10テンプレート開始施設複合体であり、n-エチルマレイミドによって阻害されます。セファロース6bで異常なゲルろ過挙動を示し、DNAポリメラーゼベータと比較してDNAセルロースと比較的弱く結合します。N-エチルマレイミドによる阻害に対する酵素Dの極端な感度は、DEAEセルロースカラムからの溶出位置と同様に、A1とCと区別します。一方、酵素CとDは、酵素A1とは異なり、45度Cで加熱することにより容易に不活性化されます。子牛胸腺DNAポリメラーゼアルファの複数の活性の可能性のある相互関係について説明します。

The heterogeneity of calf thymus DNA polymerase-alpha has been further investigated. In particular, an enzyme (enzyme D) which exhibits higher activity on poly(dA) . (dT)10 (A:T = 20:1) compared with that on activated DNA, has been further purified and its properties compared with two other activities of the DNA polymerase-alpha fraction (enzymes A1 and C) which do not show a preference for poly(dA) . (dT)10 over activated DNA. As with A1 and C, enzyme D was shown to have many of the characteristic properties of DNA polymerase-alpha in that it is an acidic protein as judged by its binding to DEAE-cellulose, has a molecular weight of about 140000, does not use a poly (A) . (dT)10 template-initiator complex and is inhibited by N-ethylmaleimide. It exhibits anomalous gel filtration behaviour on Sepharose 6B and it binds relatively weakly to DNA-cellulose compared with DNA polymerase-beta. The extreme sensitivity of enzyme D to inhibtion by N-ethylmaleimide distinguishes it from A1 and C, as does its elution position from a DEAE-cellulose column. On the other hand enzymes C and D are readily inactivated by heating at 45 degrees C unlike enzyme A1. The possible interrelationships of the multiple activities of calf thymus DNA polymerase-alpha are discussed.