脱落膜化とシンデカン-1ノックダウン胚性刺激によって誘導されるアポトーシスに子宮内膜間質細胞を感作する

子宮内膜である母体子宮の内壁へのヒト胚の浸潤と着床は、妊娠を成功させるための極めて重要なプロセスです。子宮内膜上皮層の破壊はプログラムされた細胞死とすでに相関していたが、移植中の亜鉛沈着子宮内膜間質細胞のアポトーシスの役割は不明瞭です。目的は、アポトーシスが間質浸潤において役割を果たすかどうかを明確にし、胚性刺激に対する子宮内膜間質細胞のアポトーシス感受性が脱落膜化とシンデカン-1の影響を受けるかどうかを特徴付けることでした。したがって、不死化されたヒト子宮内膜間質細胞株ST1を使用して、最初に安定したシンデカン-1ノックダウン（KDS1）を使用して新しい細胞株を生成し、2番目にプロゲステロンで細胞をさらに脱分離しました。倫理的に適用できない胚の置換として、すべての細胞は胚因子と分泌産物で処理され、インターフェロン-1β、インターフェロン-γ、腫瘍壊死因子-α、成長因子-β1、および抗FAS抗体が胚接触を模倣しました。アポトーシスの検出は、カスパーゼELISA、PARP切断、およびアネキシンV染色を介して検証されました。アポトーシス関連タンパク質は抗体アレイを介して調査され、基礎となるシグナル伝達経路をウエスタンブロットで分析しました。非決定化された子宮内膜間質細胞は、脱落膜化とシンデカン-1のノックダウンによって取り消されたアポトーシスに対する耐性を示しました。これは、いくつかの抗アポトーシスタンパク質の発現の変化と相関しており、アポトティス関連タンパク質の上流メディエーターとして、非分化ST-T1における生存促進AKTのより高い活性化に関連していました。この研究は、妊娠を正常に確立するために間質細胞アポトーシスの重要な役割を提案する、主にとらえどころのない移植のプロセスに関する洞察を提供します。アポトーシスシグナルの減衰におけるシンデカン-1の影響は、妊娠障害に対するすでに説明されている影響に照らして特に興味深いため、不十分な着床によって引き起こされる妊娠合併症を防ぐために、将来的に有用な臨床ツールを提供する可能性があります。

Human embryo invasion and implantation into the inner wall of the maternal uterus, the endometrium, is the pivotal process for a successful pregnancy. Whereas disruption of the endometrial epithelial layer was already correlated with the programmed cell death, the role of apoptosis of the subjacent endometrial stromal cells during implantation is indistinct. The aim was to clarify whether apoptosis plays a role in the stromal invasion and to characterize if the apoptotic susceptibility of endometrial stromal cells to embryonic stimuli is influenced by decidualization and Syndecan-1. Therefore, the immortalized human endometrial stromal cell line St-T1 was used to first generate a new cell line with a stable Syndecan-1 knock down (KdS1), and second to further decidualize the cells with progesterone. As a replacement for the ethically inapplicable embryo all cells were treated with the embryonic factors and secretion products interleukin-1β, interferon-γ, tumor necrosis factor-α, transforming growth factor-β1 and anti-Fas antibody to mimic the embryo contact. Detection of apoptosis was verified via Caspase ELISAs, PARP cleavage and Annexin V staining. Apoptosis-related proteins were investigated via antibody arrays and underlying signaling pathways were analyzed by Western blot. Non-decidualized endometrial stromal cells showed a resistance towards apoptosis which was rescinded by decidualization and Syndecan-1 knock down independent of decidualization. This was correlated with an altered expression of several pro- and anti-apoptotic proteins and connected to a higher activation of pro-survival Akt in non-differentiated St-T1 as an upstream mediator of apoptotis-related proteins. This study provides insight into the largely elusive process of implantation, proposing an important role for stromal cell apoptosis to successfully establish a pregnancy. The impact of Syndecan-1 in attenuating the apoptotic signal is particularly interesting in the light of an already described influence on pregnancy disorders and therefore might provide a useful clinical tool in the future to prevent pregnancy complications provoked by inadequate implantation.