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Metabolic engineering2015May01Vol.29issue()

エンジニアリングEscherichia coliによるグルコースからのポリ(3-ヒドロキシプロピオン酸)およびポリ(3-ヒドロキシブチレート-Co-3-ヒドロキシプロピオン酸)の産生

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

ポリ(3-ヒドロキシプロピオン酸塩)(P3HP)は、1,3-プロパンディオールまたはグリセロールで栽培された細菌によって合成された微生物ポリヒドロキシアルカン酸(PHA)の最も強力なファミリーメンバーです。この研究では、p3HPの合成経路と3-ヒドロキシブチレート(3HB)および3-ヒドロキシプロピオン酸(3HP)のコポリマーP3HB3HPは、より豊富な炭素源であるグルコースからの合成のためにそれぞれ組み立てられました。組換え大腸菌は、グリセロール-3-リン酸デヒドロゲナーゼ(GPD1)、グリセロール-3-Pホスファターゼ(GPP2)をコードするグリセロール-3-リン酸デヒドロゲナーゼ(gpp2)をコードするグリセロール-3-pホスファターゼ(GPP2)をコードするグリセロミセスセレビシアからグラコースの触媒の触媒の触媒の形成の触媒と触媒の触媒を植えます。(Dhab123)グリセロールを3-ヒドロキシプロピオンアルデヒドに移し、3-ヒドロッポイオルデス型に誘導するサルモネラからのデヒドロゲナーゼ(PDUP)をエンコードする遺伝子をエンコードする遺伝子をエンコードする肺炎球菌の再活性化因子(GDRAB)を使用してくださいA、遺伝子と一緒に3-ヒドロキシプロピオニル-CoAをP3HPに重合するラルストニアユートロファのPHAシンターゼ(PHAC)の。それぞれβ-セトチオラーゼとアセト酢酸レダクターゼをコードするラルストニアユートロファのPHAAおよびPHABが、上記のP3HPに導入され、組換え大腸菌、コポリマー、ポリ(3-ヒドロキシブチル酸-Co-3-ヒドロキシオン酸)(P3HHB3HP)(P3HB3HP)が合成されました。唯一の炭素源。グルコースLB培地で成長した上記の大腸菌組換え剤は、48時間のシェイクフラスコ研究で、それぞれ18%P3HPおよび42%P(3HB-CO-84mol%3HP)を含む5g/L細胞乾燥重量をそれぞれ成功裏に生成しました。

ポリ(3-ヒドロキシプロピオン酸塩)(P3HP)は、1,3-プロパンディオールまたはグリセロールで栽培された細菌によって合成された微生物ポリヒドロキシアルカン酸(PHA)の最も強力なファミリーメンバーです。この研究では、p3HPの合成経路と3-ヒドロキシブチレート(3HB)および3-ヒドロキシプロピオン酸(3HP)のコポリマーP3HB3HPは、より豊富な炭素源であるグルコースからの合成のためにそれぞれ組み立てられました。組換え大腸菌は、グリセロール-3-リン酸デヒドロゲナーゼ(GPD1)、グリセロール-3-Pホスファターゼ(GPP2)をコードするグリセロール-3-リン酸デヒドロゲナーゼ(gpp2)をコードするグリセロール-3-pホスファターゼ(GPP2)をコードするグリセロミセスセレビシアからグラコースの触媒の触媒の触媒の形成の触媒と触媒の触媒を植えます。(Dhab123)グリセロールを3-ヒドロキシプロピオンアルデヒドに移し、3-ヒドロッポイオルデス型に誘導するサルモネラからのデヒドロゲナーゼ(PDUP)をエンコードする遺伝子をエンコードする遺伝子をエンコードする肺炎球菌の再活性化因子(GDRAB)を使用してくださいA、遺伝子と一緒に3-ヒドロキシプロピオニル-CoAをP3HPに重合するラルストニアユートロファのPHAシンターゼ(PHAC)の。それぞれβ-セトチオラーゼとアセト酢酸レダクターゼをコードするラルストニアユートロファのPHAAおよびPHABが、上記のP3HPに導入され、組換え大腸菌、コポリマー、ポリ(3-ヒドロキシブチル酸-Co-3-ヒドロキシオン酸)(P3HHB3HP)(P3HB3HP)が合成されました。唯一の炭素源。グルコースLB培地で成長した上記の大腸菌組換え剤は、48時間のシェイクフラスコ研究で、それぞれ18%P3HPおよび42%P(3HB-CO-84mol%3HP)を含む5g/L細胞乾燥重量をそれぞれ成功裏に生成しました。

Poly(3-hydroxypropionate) (P3HP) is the strongest family member of microbial polyhydroxyalkanoates (PHA) synthesized by bacteria grown on 1,3-propandiol or glycerol. In this study synthesis pathways of P3HP and its copolymer P3HB3HP of 3-hydroxybutyrate (3HB) and 3-hydroxypropionate (3HP) were assembled respectively to allow their synthesis from glucose, a more abundant carbon source. Recombinant Escherichia coli was constructed harboring the P3HP synthetic pathway consisting of heterologous genes encoding glycerol-3-phosphate dehydrogenase (gpd1), glycerol-3-P phosphatase (gpp2) from Saccharomyces cerevisiae that catalyzes formation of glycerol from glucose, and genes coding glycerol dehydratase (dhaB123) with its reactivating factors (gdrAB) from Klebsiella pneumoniae that transfer glycerol to 3-hydroxypropionaldehyde, as well as gene encoding propionaldehyde dehydrogenase (pdup) from Salmonella typhimurium which converts 3-hydroxypropionaldehyde to 3-hydroxypropionyl-CoA, together with the gene of PHA synthase (phaC) from Ralstonia eutropha which polymerizes 3-hydroxypropionyl-CoA into P3HP. When phaA and phaB from Ralstonia eutropha respectively encoding β-ketothiolase and acetoacetate reductase, were introduced into the above P3HP producing recombinant E. coli, copolymers poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxypropionate) (P3HB3HP) were synthesized from glucose as a sole carbon source. The above E. coli recombinants grown on glucose LB medium successfully produced 5g/L cell dry weight containing 18% P3HP and 42% P(3HB-co-84mol% 3HP), respectively, in 48h shake flask studies.

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