テトランドリンは、ヒトの心筋線維芽細胞の活性化と心筋線維症を逆転させます

Tetrandrine（TTD）は、文書化された抗線維性作用を備えたカルシウムチャネルブロッカーです。この研究では、初めて、TTDがin vitroのヒト心筋線維芽細胞の活性化を直接防止し、in vivo心筋線維症を制限できることを特定しました。in vitroでは、ヒト心房生検（n = 10）からの心筋線維芽細胞を3次元コラーゲンマトリックスに播種しました。細胞 - コラーゲン構造物は、TTD（1および5μM）を48時間変換する（10 ng/mL）に変換された成長因子-β1（10 ng/mL）にさらされました。コラーゲンゲル収縮、筋線維芽細胞の活性化（α-スムース筋アクチン発現）、プロビブリックmRNAの発現、およびコラーゲンタンパク質合成の速度を比較しました。TTDは、コラーゲンゲル収縮の減少（79.7±1.3対60.1±8.9％、p <0.01）、α-スムース筋アクチン発現（フローサイトメトリー）、コラーゲン合成（[（3）H]プロリンの組み込み）、およびコラーゲンmRNAの発現を減少させました。細胞生存率はグループ間で類似していた（アネキシン陽性細胞：1.7対1.4％）。TTDは、T型およびL型カルシウムチャネルブロッカーの存在下でコラーゲンゲル収縮を阻害し、細胞内カルシウムキレート剤Bapta-AM（15μM）が阻害され、観察された効果はカルシウムの恒常性によって媒介されないことを示唆しています。in vivoでは、ダール塩濃度の高血圧ラットを、4週間の腹腔内注射により）のさまざまな用量で処理し、未処理のコントロールと比較しました（n = 12）。全身血圧は尾のカフによって監視されました。心筋線維症と左心室コンプライアンスは、組織学と受動的圧力体積分析によって評価されました。心筋線維症は、未処理のコントロールと比較して減衰した（％コラーゲン領域：9.4±7.3対2.1±1.0％、p <0.01）。左心室コンプライアンスが保存されました。結論として、TTDは、カルシウムチャネル遮断とは無関係に、ヒトの心筋線維芽細胞の活性化と心筋線維症を逆転させます。

Tetrandrine (TTD) is a calcium channel blocker with documented antifibrotic actions. In this study, for the first time, we identified that TTD can directly prevent in vitro human cardiac myofibroblast activation and limit in vivo myocardial fibrosis. In vitro, cardiac myofibroblasts from human atrial biopsies (N = 10) were seeded in three-dimensional collagen matrices. Cell-collagen constructs were exposed to transforming growth factor-β1 (10 ng/ml), with or without TTD (1 and 5 μM) for 48 h. Collagen gel contraction, myofibroblast activation (α-smooth muscle actin expression), expression of profibrotic mRNAs, and rate of collagen protein synthesis were compared. TTD decreased collagen gel contraction (79.7 ± 1.3 vs 60.1 ± 8.9%, P < 0.01), α-smooth muscle actin expression (flow cytometry), collagen synthesis ([(3)H]proline incorporation), and collagen mRNA expression. Cell viability was similar between groups (annexin positive cells: 1.7 vs. 1.4%). TTD inhibited collagen gel contraction in the presence of T-type and L-type calcium channel blockers, and the intracellular calcium chelator BAPTA-AM (15 μM), suggesting that the observed effects are not mediated by calcium homeostasis. In vivo, Dahl salt-sensitive hypertensive rats were treated with variable doses of TTD (by intraperitoneal injection over 4 wk) and compared with untreated controls (N = 12). Systemic blood pressure was monitored by tail cuff. Myocardial fibrosis and left ventricular compliance were assessed by histology and passive pressure-volume analysis. Myocardial fibrosis was attenuated compared with untreated controls (%collagen area: 9.4 ± 7.3 vs 2.1 ± 1.0%, P < 0.01). Left ventricular compliance was preserved. In conclusion, TTD reverses human cardiac myofibroblast activation and myocardial fibrosis, independent of calcium channel blockade.