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病原性因子放出システムとしてのVI分泌システム（T6SS）は、さまざまな病原体の病原性の発達に寄与し、標的細胞との接触時にしばしば活性化されます。Citrobacter Freundii株CF74には、CLPV、HCP-2、およびVGR T6SS遺伝子を含む完全なT6SSゲノム島（GI）があります。CF74にCLPV、HCP-2、VGR、およびT6SS GI欠失変異体を構築し、転写と翻訳のレベルでトランスクリプトーム全体、特に鞭毛系に対する影響を分析しました。T6SS GIの削除は、84の遺伝子の転写に影響を与え、15および69の遺伝子はそれぞれ転写のレベルがそれぞれ高く、それぞれ低いレベルを示しました。CF74ΔT6SS変異体のダウンレギュレートされた遺伝子の細胞運動性クラスのメンバーは、主にエフェクタータンパク質、シャペロン、レギュレータを含む鞭毛遺伝子でした。さらに、FLICの産生と分泌は、CF74のCLPV、HCP-2、VGR、またはT6SS GI欠失変異体でも減少し、補完時に回復しました。水泳の運動性アッセイでは、変異株は野生型よりも運動性が低いことがわかり、運動性は補完によって回復しました。変異株は、HEP-2細胞への接着に欠陥があり、補完時に部分的に回復しました。さらに、CF74ΔT6SS、CF74ΔCLPV、およびCF74ΔHCP-2変異体は、野生型よりもHEP-2細胞に対して低い細胞毒性を誘導しました。これらの結果は、CF74のT6SS GIが鞭毛系を調節し、運動性を高め、宿主細胞の順守に関与し、宿主細胞に対する細胞毒性を誘導することを示唆しています。したがって、T6SSはC. freundiiで幅広い役割を果たしています。
病原性因子放出システムとしてのVI分泌システム（T6SS）は、さまざまな病原体の病原性の発達に寄与し、標的細胞との接触時にしばしば活性化されます。Citrobacter Freundii株CF74には、CLPV、HCP-2、およびVGR T6SS遺伝子を含む完全なT6SSゲノム島（GI）があります。CF74にCLPV、HCP-2、VGR、およびT6SS GI欠失変異体を構築し、転写と翻訳のレベルでトランスクリプトーム全体、特に鞭毛系に対する影響を分析しました。T6SS GIの削除は、84の遺伝子の転写に影響を与え、15および69の遺伝子はそれぞれ転写のレベルがそれぞれ高く、それぞれ低いレベルを示しました。CF74ΔT6SS変異体のダウンレギュレートされた遺伝子の細胞運動性クラスのメンバーは、主にエフェクタータンパク質、シャペロン、レギュレータを含む鞭毛遺伝子でした。さらに、FLICの産生と分泌は、CF74のCLPV、HCP-2、VGR、またはT6SS GI欠失変異体でも減少し、補完時に回復しました。水泳の運動性アッセイでは、変異株は野生型よりも運動性が低いことがわかり、運動性は補完によって回復しました。変異株は、HEP-2細胞への接着に欠陥があり、補完時に部分的に回復しました。さらに、CF74ΔT6SS、CF74ΔCLPV、およびCF74ΔHCP-2変異体は、野生型よりもHEP-2細胞に対して低い細胞毒性を誘導しました。これらの結果は、CF74のT6SS GIが鞭毛系を調節し、運動性を高め、宿主細胞の順守に関与し、宿主細胞に対する細胞毒性を誘導することを示唆しています。したがって、T6SSはC. freundiiで幅広い役割を果たしています。
The type VI secretion system (T6SS) as a virulence factor-releasing system contributes to virulence development of various pathogens and is often activated upon contact with target cells. Citrobacter freundii strain CF74 has a complete T6SS genomic island (GI) that contains clpV, hcp-2, and vgr T6SS genes. We constructed clpV, hcp-2, vgr, and T6SS GI deletion mutants in CF74 and analyzed their effects on the transcriptome overall and, specifically, on the flagellar system at the levels of transcription and translation. Deletion of the T6SS GI affected the transcription of 84 genes, with 15 and 69 genes exhibiting higher and lower levels of transcription, respectively. Members of the cell motility class of downregulated genes of the CF74ΔT6SS mutant were mainly flagellar genes, including effector proteins, chaperones, and regulators. Moreover, the production and secretion of FliC were also decreased in clpV, hcp-2, vgr, or T6SS GI deletion mutants in CF74 and were restored upon complementation. In swimming motility assays, the mutant strains were found to be less motile than the wild type, and motility was restored by complementation. The mutant strains were defective in adhesion to HEp-2 cells and were restored partially upon complementation. Further, the CF74ΔT6SS, CF74ΔclpV, and CF74Δhcp-2 mutants induced lower cytotoxicity to HEp-2 cells than the wild type. These results suggested that the T6SS GI in CF74 regulates the flagellar system, enhances motility, is involved in adherence to host cells, and induces cytotoxicity to host cells. Thus, the T6SS plays a wide-ranging role in C. freundii.
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