in vitroでのヒト表皮ケラチノサイト培養の改善における考慮

目的：患者の重度の火傷治療にこれらの細胞の適用には、表皮ケラチノサイトの大規模な拡大が不可欠です。したがって、この研究は、ヒトの表皮ケラチノサイトの拡大に​​おけるさまざまな条件を評価するように設計されました。 材料と方法：表皮は、インスパゼを使用して皮膚サンプルの真皮から分離されました。表皮は、ケラチノサイトの分離のためにトリプシン化されました。ケラチノサイトは、ヒトの皮膚線維芽細胞療法層、マイトマイシンC治療、および異なる培養培地の有無にかかわらず、さまざまな条件で培養されました。 結果：我々の結果は、ヒト皮膚線維芽細胞フィブラストフィーダー層で培養されたケラチノサイトがいくつかの通路で栽培されたことを示唆しています。広範な変形と急速な劣化が、フィーダー層のない培養細胞および血清を含まない培地で観察されました。 結論：マイトマイシンCで処理したヒト皮膚線維芽細胞は、ケラチノサイトの増殖に最適な条件を提供できます。

OBJECTIVES: Large-scale expansion of epidermal keratinocytes is essential in the application of these cells for severe burn treatment in patients. Therefore, this study was designed to evaluate various conditions in the expansion of human epidermal keratinocytes. MATERIALS AND METHODS: The epidermis was separated from the dermis of skin samples using dispase. The epidermis was trypsinized for keratinocyte isolation. Keratinocytes were cultured in various conditions, with or without a human dermal fibroblast feeder layer, mitomycin C treatment, and different culture media. RESULTS: Our results suggest that keratinocytes cultured on a human dermal fibroblast feeder layer were grown for several passages. Extensive deformation and rapid deterioration were observed in the cultured cells without a feeder layer and in serum-free medium. CONCLUSIONS: Human dermal fibroblasts treated with mitomycin C can provide optimal conditions for proliferation of keratinocytes.