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背景と目的：貯蔵中の赤血球膜の変化に血液成分分離方法が持つ影響はよく理解されていません。カナダでは、赤血球濃縮物（RCC）は、バフィーコート（BC、上/下）および全血ろ過（WBF、上/上部）法を使用して生成され、この研究は、貯蔵中のそれぞれの製品に蓄積された細胞外小胞（EV）の特性に対する影響を比較することを目的としています。 材料と方法：フローサイトメトリー、動的光散乱、質量分析を使用して、濃度、サイズ、脂質組成、および上清ヘモグロビン（HB）との相関についてRCC EVを評価しました。 結果：RBC EVS（CD235A（+））の蓄積は、WBFおよびBC RCCで類似していた。EVのサイズは、D5でd5の<100 nmからd42 nm近くまで変化し、WBFからのEVは、すべてのストレージ時にBC RCCよりも小さく（p <0. 001）。WBFおよびBCユニットにおけるEV結合HBの量は類似していた（上清総HBの約10％）。WBF EVSとBC EVSは、同様の脂質組成を示しました。 結論：保管中のBCおよびWBF RCCの溶血とEVの増加。WBFおよびBC RCCのEVのサイズ特性の違いは、非RBC EVがWBF製品でより一般的であることを示唆しています。RCCSのEVのさまざまな集団の特性に製造が与える影響を理解することで、品質改善の取り組みが役立ちます。
背景と目的：貯蔵中の赤血球膜の変化に血液成分分離方法が持つ影響はよく理解されていません。カナダでは、赤血球濃縮物（RCC）は、バフィーコート（BC、上/下）および全血ろ過（WBF、上/上部）法を使用して生成され、この研究は、貯蔵中のそれぞれの製品に蓄積された細胞外小胞（EV）の特性に対する影響を比較することを目的としています。 材料と方法：フローサイトメトリー、動的光散乱、質量分析を使用して、濃度、サイズ、脂質組成、および上清ヘモグロビン（HB）との相関についてRCC EVを評価しました。 結果：RBC EVS（CD235A（+））の蓄積は、WBFおよびBC RCCで類似していた。EVのサイズは、D5でd5の<100 nmからd42 nm近くまで変化し、WBFからのEVは、すべてのストレージ時にBC RCCよりも小さく（p <0. 001）。WBFおよびBCユニットにおけるEV結合HBの量は類似していた（上清総HBの約10％）。WBF EVSとBC EVSは、同様の脂質組成を示しました。 結論：保管中のBCおよびWBF RCCの溶血とEVの増加。WBFおよびBC RCCのEVのサイズ特性の違いは、非RBC EVがWBF製品でより一般的であることを示唆しています。RCCSのEVのさまざまな集団の特性に製造が与える影響を理解することで、品質改善の取り組みが役立ちます。
BACKGROUND AND OBJECTIVES: The influence that blood component separation methods have on changes to the red blood cell membrane during storage is not well understood. In Canada, red cell concentrates (RCCs) are produced using the buffy coat (BC, top/bottom) and the whole-blood filtration (WBF, top/top) methods, and this study aimed at comparing their influence on the characteristics of the extracellular vesicles (EV) which accumulated in the respective products during storage. MATERIALS AND METHODS: Using flow cytometry, dynamic light scattering and mass spectrometry, we assessed RCC EVs for concentration, size, lipid composition and correlation with supernatant haemoglobin (Hb). RESULTS: Accumulation of RBC EVs (CD235a(+) ) with storage time was similar in WBF and BC RCCs. The size of the EVs changed from <100 nm at d5 to near 200 nm by d42, with the EVs from WBF being smaller (P < 0·001) than BC RCCs at all storage times. The amount of EV-bound Hb in the WBF and BC units was similar (about 10% of total supernatant Hb). WBF EVs and BC EVs displayed similar lipid composition. CONCLUSION: Haemolysis and EVs increase in BC and WBF RCCs during storage. Differences in the size characteristics of the EVs in WBF and BC RCCs suggest that non-RBC EVs are more prevalent in WBF products. Understanding the impact that manufacturing has on the characteristics of the different populations of EVs in RCCs will aid quality improvement efforts.
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