バイオチップアレイテクノロジー免疫測定パフォーマンスと尿職場の薬物検査のためのデザイナーピペラジンの定量的確認

デザイナーのピペラジンは、同定のためのハイスループットスクリーニング方法はほとんどなく、新たな新規精神活性物質（NP）です。フェニルピペラジン（PNP）およびベンジルピペラジン（BZP）のバイオチップアレイ技術（BAT）イムノアッセイを評価し、20,017回のランダムに収集した尿職場標本を分析しました。推奨カットオフでの免疫測定パフォーマンスは、PNPI（5μg/L）、PNPII（7.5μg/L）、およびBZP（5μg/L）抗体について評価されました。液体クロマトグラフィー高解像度質量分析（LC-HRMS）により、840の正の陽性および206のランダムに選択された推定の推定標本が確認されました。PNPI、PNPII、およびBZPの検出のアッセイ制限は、それぞれ2.9、6.3、および2.1μg/Lでした。キャリブレーション曲線は線形（R（2）> 0.99）で、PNPI/PNIIで42μg/L、BZPで100μg/Lの上限がありました。品質制御サンプルは、標的のCV <19.3％<19.3％と精度86.0-94.5％を示しました。106個の非ピペラジン物質からの干渉はありませんでした。840の推定陽性標本（9.3％）のうち78はLC-HRMS陽性であり、1-（3-クロロフェニル）ピペラジン（MCPP）、デザイナーピペラジンおよび抗うつ薬トロゾン代謝物に対して72陽性でした。206の推定負の負の標本のうち、1つはMCPP（3.3μg/L）に対して陽性であり、1つはBZP（3.6μg/L）で確認されました。BAT特異性（21.1〜91.4％）および効率（27.0〜91.6％）が増加し、25μg/L PNPI、42μg/L PNPI、および100μg/L BZPの最適化されたカットオフで感度がわずかに低下しました（97.5〜93.8％）。ピペラジンNPを特定するには、ハイスループットスクリーニング方法が必要です。Randox Bat ImmunoAssayのパフォーマンスを評価して、尿中ピペラジンを特定し、抗体のカットオフが上がったときにパフォーマンスの向上を記録しました。さらに、ランダム化された職場での尿標本では、2つの陽性標本を除くすべてがMCPPおよび/またはトラゾドンを含む可能性が高いと、おそらく合法的な医療処方箋によるものでした。尿中のデザイナーピペラジン検出用のグラフィカル抽象バイオチップアレイテクノロジー（BAT）イムノアッセイ。化学発光免疫測定法では、標識された薬物（抗原）が尿中の薬物と競合します。薬物が存在しない場合、標識された薬物は抗体に結合し、酵素（西洋ワラディッシュペルオキシダーゼ）を放出して基質と反応し、化学発光を生成します。尿中の薬物濃度が高いほど、化学発光シグナルが弱くなります。すべての推定陽性標本およびランダムに選択された推定された推定負の標本を分析し、2.5または5μg/Lの定量化制限を備えた液体クロマトグラフィー高解像度質量分析によって確認されました。

Designer piperazines are emerging novel psychoactive substances (NPS) with few high-throughput screening methods for their identification. We evaluated a biochip array technology (BAT) immunoassay for phenylpiperazines (PNP) and benzylpiperazines (BZP) and analyzed 20,017 randomly collected urine workplace specimens. Immunoassay performance at recommended cutoffs was evaluated for PNPI (5 μg/L), PNPII (7.5 μg/L), and BZP (5 μg/L) antibodies. Eight hundred forty positive and 206 randomly selected presumptive negative specimens were confirmed by liquid chromatography high-resolution mass spectrometry (LC-HRMS). Assay limits of detection for PNPI, PNPII, and BZP were 2.9, 6.3, and 2.1 μg/L, respectively. Calibration curves were linear (R (2) > 0.99) with upper limits of 42 μg/L for PNPI/PNII and 100 μg/L for BZP. Quality control samples demonstrated imprecision <19.3 %CV and accuracies 86.0-94.5 % of target. There were no interferences from 106 non-piperazine substances. Seventy-eight of 840 presumptive positive specimens (9.3 %) were LC-HRMS positive, with 72 positive for 1-(3-chlorophenyl)piperazine (mCPP), a designer piperazine and antidepressant trazodone metabolite. Of 206 presumptive negative specimens, one confirmed positive for mCPP (3.3 μg/L) and one for BZP (3.6 μg/L). BAT specificity (21.1 to 91.4 %) and efficiency (27.0 to 91.6 %) increased, and sensitivity slightly decreased (97.5 to 93.8 %) with optimized cutoffs of 25 μg/L PNPI, 42 μg/L PNPI, and 100 μg/L BZP. A high-throughput screening method is needed to identify piperazine NPS. We evaluated performance of the Randox BAT immunoassay to identify urinary piperazines and documented improved performance when antibody cutoffs were raised. In addition, in randomized workplace urine specimens, all but two positive specimens contained mCPP and/or trazodone, most likely from legitimate medical prescriptions. Graphical Abstract Biochip array technology (BAT) immunoassay for designer piperazines detection in urine. In chemiluminescent immunoassay, the labeled-drug (antigen) competes with the drug in the urine. In the absence of drug, the labeled-drug binds to the antibody releasing an enzyme (horseradish peroxidase) to react with the substrate and producing chemiluminescence. The higher the drug concentration in urine, the weaker the chemiluminescent signal is produced. All presumptive positive specimens and randomly selected presumptive negative specimens were analyzed and confirmed by a liquid chromatography high-resolution mass spectrometry with limit of quantification of 2.5 or 5 μg/L.