グルタミン酸誘発性神経毒性に対するコレートによって安定化されたエリスロポエチンを搭載したポリ（乳酸 - コグリコール酸）ナノ粒子の保護効果

この研究の最終的な目的は、組換えヒトエリスロポエチン（RHEPO）搭載ポリ（乳酸-Co-グリコール酸）（PLGA）ナノ粒子の神経保護効果を確認することでした。脳虚血のin vitroモデルを使用したRhepoのもの。Rhepo-CH-NPSの有無にかかわらず、ヒト神経芽細胞腫細胞株であるSH-SY5Y細胞でのグルタミン酸誘発励起毒性損傷を定量的に評価しました。Rhepo-CH-NPSは、PLGA、カラトリウム水和物、および酢酸エチルを備えた水中油（w/o/w）エマルジョン溶媒蒸発技術を使用して慎重に調製しました。rhepo-ch-npsは、透過型電子顕微鏡（TEM）と微分走査熱量測定（DSC）の両方によって完全に特徴付けられました。さらに、これらの粒子の有意な細胞内摂取は、共焦点顕微鏡によって監視されました。特に、3- [4,5-ジメチルチアゾール-2-イル] -2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロマイド（MTT）アッセイと核変化は4 '、6-ジアミジノ-2-フェニルインドール（DAPI）染色誘導により観察されました。細胞は、Rhepo-CH-NPが調査されたあらゆる濃度でより安全であり、より多くの神経細胞を救出する一方で、グルタミン酸誘発性励起毒性損傷に対する正常球性特徴を保存することを実証しました。

The final aim of this study was to confirm the neuroprotective effects of recombinant human erythropoietin (rhEPO)-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) nanoparticles stabilized by sodium cholate (rhEPO-Ch-NP) and compare their effects with those of rhEPO using an in vitro model of cerebral ischemia. Glutamate-induced excitotoxic damage on SH-SY5Y cells, a human neuroblastoma cell line, with or without rhEPO-Ch-NPs was quantitatively evaluated. The rhEPO-Ch-NPs were carefully prepared using a water-in-oil-in-water (w/o/w) emulsion solvent evaporation technique with PLGA, sodium cholate hydrate, and ethyl acetate. The rhEPO-Ch-NPs were fully characterized by both transmission electron microscopy (TEM) and differential scanning calorimetry (DSC). In addition, significant intracellular uptake of these particles was monitored by confocal microscopy. Notably, the 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay and nuclear changes observed by 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) staining in SH-SY5Y cells demonstrated that rhEPO-Ch-NPs were safer at any concentration investigated and rescued more neuronal cells, while preserving normocytic features against glutamate-induced excitotoxic damages compared to rhEPO.