成体の人間の卵巣におけるc-kitおよびkitlの発現と局在化

背景：C-kit/kitリガンド（kitl）シグナル伝達軸は、哺乳類の卵巣卵胞形成の重要な成分ですが、生殖年齢の女性の卵巣におけるその主要成分の発現と局在についてはほとんど知られていません。この研究の目的は、C-KITおよびKITLアイソフォームのmRNA発現と、成人のヒト以前の閉経前卵巣におけるC-KITおよびKITLタンパク質の局在を特徴付けることを目的としています。 方法：この研究では、生殖補助剤の排出前卵胞から得られた顆粒膜細胞、婦人科手術を受けている閉経前の女性から得られた卵巣組織の断片、およびアーカイブパラフィンが包まれた閉経前卵巣組織をアーカイブしました。方法論には、遺伝子発現のためのPCRと、タンパク質発現のためのウエスタンブロットまたは免疫組織化学が含まれていました。 結果：gnnk+およびgnnk-として知られるc-kit mRNAアイソフォームの両方がヒト卵巣皮質で検出されましたが、kitlタンパク質アイソフォーム（kitl1およびkitl2）は卵巣皮質とヒト顆粒膜細胞に存在しました。免疫組織化学は、発達中の卵胞内の複数の細胞タイプにおけるKITLおよびC-KITタンパク質の発現を、原始卵胞から大きな胞状卵胞に加えて、萎縮性卵胞に加えて、すべての卵胞段階の卵母細胞は、C-KITタンパク質のみを発現しました。興味深いことに、動物モデルとは異なり、両方のタンパク質の発現は、顆粒膜、ThecA、および間質細胞に免疫染色を伴う細胞型特異的分布を示し、ヒト卵巣内でオートクリンシグナル伝達が発生することを示唆しています。 結論：この研究の結果は、さまざまな動物モデルで確立されているように、ヒト卵巣でもc-kit/kitlシグナル伝達が発生し、以前は未知のオートクリンシグナル伝達が含まれる可能性があることを示しています。

BACKGROUND: The c-kit/kit ligand (KITL) signalling axis is an essential component of ovarian folliculogenesis in mammals, but little is known about expression and localisation of its key components in the ovaries of reproductive age women. This study aimed to characterise mRNA expression of c-kit and KITL isoforms and the localisation of c-kit and KITL proteins in adult human premenopausal ovaries. METHODS: This study utilised granulosa cells obtained from the preovulatory follicles of women undergoing assisted reproduction, pieces of ovarian tissue obtained from premenopausal women undergoing gynaecological surgeries and archival paraffin-embedded premenopausal ovarian tissues. Methodology included PCR for gene expression and Western blot or immunohistochemistry for protein expression. RESULTS: Both c-kit mRNA isoforms, known as GNNK+ and GNNK-, were detected in human ovarian cortex, while KITL protein isoforms (KITL1 and KITL2) were present in ovarian cortex and human granulosa cells. Immunohistochemistry showed expression of KITL and c-kit protein in multiple cell types within follicles throughout development, from primordial follicles to large antral follicles, in addition to atretic follicles. Oocytes of all follicle stages expressed c-kit protein exclusively. Interestingly, unlike animal models, expression of both proteins displayed a less cell-type specific distribution with immunostaining present in granulosa, theca and stromal cells, suggesting that autocrine signalling occurs within the human ovary. CONCLUSION: The results of this study indicate that c-kit/KITL signalling also occurs in the human ovary, as established in various animal models, and may involve previously unknown autocrine signalling.