体積吸収型マイクロサンプリングは、乾燥血液サンプル中のカフェインとパラクシンチンのヘマトクリットバイアスを排除しますか？比較研究

体積吸収マイクロサンプリング（VAMS）は、吸収性ポリマーの先端を浸すことにより、血液の滴またはプールからの正確な体積（約10μL）の簡単な収集を可能にする新しいサンプリング手法です。得られた血液マイクロサンプルは乾燥し、全体として分析されます。この研究の目的は、乾燥血液微小サンプルの分析における重要な問題であるヘマトクリットバイアスを克服するVAMの可能性を評価することでした。VAMSサンプルのモデル化合物カフェインとパラクシンチンの分析のためのLC-MS/MSメソッドは、事前に確立されたすべての基準を完全に検証し、満たしました。乾燥血液斑点（DBS）および血液の以前に検証された手順と併せて、これにより、両方の化合物が80を超える対応するVAM、DB、および液体全血サンプルで決定される細心の比較研究を設定することができました。これらは、本物のヒト患者サンプルから生じ、広いヘマトクリット範囲（0.21-0.50）をカバーしています。参照全血濃度との違いを計算することにより、VAMSサンプルの分析物濃度は、DBSの結果とは対照的に、評価されたヘマトクリット範囲で変化したバイアスの影響を受けないことがわかりました。ただし、VAMS濃度は、一貫した陽性バイアスが観察されたため、全血濃度を過大評価する傾向があります。発生した血液とスパイクされた血液から調製されたVAMSサンプルの異なる挙動は、高いヘマトクリット値でVAMSの先端からのカフェインとパラキサンチンの回復がやや減少したことと組み合わされており、非常に類似した抽出手順を使用してDBSで観察されなかった効果は、観察されたVAMS-Whole血液偏差の基礎。この研究に基づいて、VAMの妥当性と堅牢性が発生したヒトサンプルを分析することによって評価される最初のものであるため、VAMはヘマトクリットの効果を排除するのを効果的に支援すると結論付けることができます。

Volumetric absorptive microsampling (VAMS) is a novel sampling technique that allows the straightforward collection of an accurate volume of blood (approximately 10μL) from a drop or pool of blood by dipping an absorbent polymeric tip into it. The resulting blood microsample is dried and analyzed as a whole. The aim of this study was to evaluate the potential of VAMS to overcome the hematocrit bias, an important issue in the analysis of dried blood microsamples. An LC-MS/MS method for analysis of the model compounds caffeine and paraxanthine in VAMS samples was fully validated and fulfilled all pre-established criteria. In conjunction with previously validated procedures for dried blood spots (DBS) and blood, this allowed us to set up a meticulous comparative study in which both compounds were determined in over 80 corresponding VAMS, DBS and liquid whole blood samples. These originated from authentic human patient samples, covering a wide hematocrit range (0.21-0.50). By calculating the differences with reference whole blood concentrations, we found that analyte concentrations in VAMS samples were not affected by a bias that changed over the evaluated hematocrit range, in contrast to DBS results. However, VAMS concentrations tend to overestimate whole blood concentrations, as a consistent positive bias was observed. A different behavior of VAMS samples prepared from incurred and spiked blood, combined with a somewhat reduced recovery of caffeine and paraxanthine from VAMS tips at high hematocrit values, an effect that was not observed for DBS using a very similar extraction procedure, was found to be at the basis of the observed VAMS-whole blood deviations. Based on this study, being the first in which the validity and robustness of VAMS is evaluated by analyzing incurred human samples, it can be concluded that VAMS effectively assists in eliminating the effect of hematocrit.