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背景：ウイルス固有の応答は、従来のアプローチではめったに検出されませんが、ここでは、2つの異なるアッセイによってHIV暴露セロネガティブ（HESN）患者のT細胞応答の検出を報告します。 方法：HIV特異的T細胞応答は、ブーストされた樹状細胞と48時間の共培養後、HESN患者の末梢血単核細胞の酵素結合免疫スポットによって分析されました。さらに、ブーストされたフローサイトメトリーアプローチを使用して、抗ウイルスT細胞応答をキャプチャしました。宿主の遺伝的因子とT細胞活性化も分析され、HIV曝露に対するその意味を評価しました。 結果：テストした45人のHESN個人のうち、最大11人（24.4％）がHIV GAGとNEFをカバーするペプチドプールに対して少なくとも1つの反応を示しました。HESNで検出された応答の強度（p = 0.0022）と大きさ（p = 0.0174）と、HIV陽性パートナーのウイルス量の間に正の相関が観察されました。さらに、ブーストされた流れとCytomix分析の結果は、特にCD8 T細胞集団で、HIV抗原に対するドミナントTh1様応答パターンを示しました。 結論：ブーストされたフローサイトメトリックアプローチを備えたブーストされた樹状細胞技術を組み合わせた使用により、HESN患者のより高い割合で特定のHIV陽性応答を検出し、特定のエフェクター機能プロファイルを定義することができます。この研究は、HIV感染に対する耐性のより良い理解に貢献しています。
背景：ウイルス固有の応答は、従来のアプローチではめったに検出されませんが、ここでは、2つの異なるアッセイによってHIV暴露セロネガティブ（HESN）患者のT細胞応答の検出を報告します。 方法：HIV特異的T細胞応答は、ブーストされた樹状細胞と48時間の共培養後、HESN患者の末梢血単核細胞の酵素結合免疫スポットによって分析されました。さらに、ブーストされたフローサイトメトリーアプローチを使用して、抗ウイルスT細胞応答をキャプチャしました。宿主の遺伝的因子とT細胞活性化も分析され、HIV曝露に対するその意味を評価しました。 結果：テストした45人のHESN個人のうち、最大11人（24.4％）がHIV GAGとNEFをカバーするペプチドプールに対して少なくとも1つの反応を示しました。HESNで検出された応答の強度（p = 0.0022）と大きさ（p = 0.0174）と、HIV陽性パートナーのウイルス量の間に正の相関が観察されました。さらに、ブーストされた流れとCytomix分析の結果は、特にCD8 T細胞集団で、HIV抗原に対するドミナントTh1様応答パターンを示しました。 結論：ブーストされたフローサイトメトリックアプローチを備えたブーストされた樹状細胞技術を組み合わせた使用により、HESN患者のより高い割合で特定のHIV陽性応答を検出し、特定のエフェクター機能プロファイルを定義することができます。この研究は、HIV感染に対する耐性のより良い理解に貢献しています。
BACKGROUND: Although virus-specific responses are rarely detected by conventional approaches, we report here the detection of T-cell responses in HIV-exposed seronegative (HESN) patients by two distinct assays. METHODS: HIV-specific T-cell responses were analyzed by enzyme-linked immunospot in peripheral blood mononuclear cells from HESN patients after a 48-h co-culture with boosted dendritic cells. Additionally, a boosted flow cytometry approach was used to capture antiviral T-cell responses. Host genetic factors and T-cell activation were also analyzed to assess their implication on HIV exposure. RESULTS: Of the 45 HESN individuals tested, up to 11 (24.4%) showed at least one response to peptide pools covering HIV Gag and Nef. A positive correlation was observed between the intensity (P = 0.0022) and magnitude (P = 0.0174) of the response detected in the HESN, and the viral load of the HIV-positive partner. Moreover, the result from the boosted flow and cytomix analyses showed a dominant Th1-like response pattern against HIV antigens, especially in CD8 T-cell populations. CONCLUSIONS: The combined use of our boosted dendritic cell technique with a boosted flow cytometric approach allows us both to detect specific HIV-positive responses in a higher percentage of HESN patients and to define specific effector function profiles. This study contributes to a better understanding of resistance to HIV infection.
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