中国の伝統医学のための活動と吸収ベースの品質管理プラットフォームの開発：Zeng-Sheng-Pingへの応用（抗腫瘍B）

民族薬理学的関連性：抗腫瘍Bとも呼ばれるZeng-sheng-ping（ZSP）は、がん予防に使用される販売されている中国の伝統薬です。 研究の目的：現在、中国の伝統医薬品の品質管理のために、ほとんどの場合、生物活性と医薬品行動に基づいてマーカー化合物は選択されていません。したがって、薬の「品質」が制御されていても、薬理学的効果は依然として一貫性がない可能性があります。この研究の目的は、中国の伝統薬の品質管理のためにマーカー化合物を選択するための活動と吸収ベースのプラットフォームを確立することです。 材料と方法：ZSPを参照中国の伝統医学として使用して、プラットフォームを確立しました。活動ガイド付き分別アプローチを使用して、ZSPの主要な成分を精製しました。NMRおよびMSスペクトルを使用して、分離化合物の構造を解明しました。活動を評価するために、口腔癌細胞株（SCC2095）に対するMTTアッセイを実施しました。UPLC-MS/MSを使用して、ZSPの純粋な化合物と活性画分を定量化しました。特定された化合物の透過性は、CACO-2細胞培養モデルで評価されました。分離化合物の細胞内蓄積は、SCC2095細胞で評価されました。 結果：ZSPから主要な化合物が特定されました。これらの化合物の内容、抗増殖活動、透過性、細胞内蓄積も評価されました。これらの精製化合物の構造は、NMRおよびMSデータをルタビン（1）、リモニン（2）、エボドール（3）、オバクノーネ（4）、フラキシネローン（5）、ディクタムニン（6）、マッキアイン（7）、トリフォリリチン（8）、マチリン（9）などの参照のデータと比較することにより同定されました。SCC2095細胞に対する化合物5、6、および7のIC50は、ZSPのそれよりも有意に低かった。CACO-2細胞培養モデルでは、化合物5、6、および7の取り込み透過性は、それぞれ2.58±0.3×10（-5）、4.33±0.5×10（-5）、および4.27±0.8×10（-5）でした。これらの化合物の細胞内濃度は、化合物5、6、および7が細胞内に有意に蓄積されることを示した。 結論：口腔癌細胞株に対する活性と吸収透過性に基づいて、化合物5、6、および7はZSPの品質制御マーカーとして選択されます。アクティビティと吸収ベースのプラットフォームが確立され、ZSPの品質管理に成功裏に使用されました。

ETHNOPHARMACOLOGICAL RELEVANCE: Zeng-Sheng-Ping (ZSP), also called antitumor B, is a marketed Chinese traditional medicine used for cancer prevention. AIM OF THE STUDY: Currently, for the quality control of Chinese traditional medicines, marker compounds are not selected based on bioactivities and pharmaceutical behaviors in most of the cases. Therefore, even if the "quality" of the medicine is controlled, the pharmacological effect could still be inconsistent. The aim of this study is to establish an activity and absorption-based platform to select marker compound(s) for the quality control of Chinese traditional medicines. MATERIALS AND METHODS: We used ZSP as a reference Chinese traditional medicine to establish the platform. Activity guided fractionation approach was used to purify the major components from ZSP. NMR and MS spectra were used to elucidate the structure of the isolated compounds. MTT assay against oral carcinoma cell line (SCC2095) was performed to evaluate the activities. UPLC-MS/MS was used to quantify the pure compounds in ZSP and the active fraction. The permeabilities of the identified compounds were evaluated in the Caco-2 cell culture model. The intracellular accumulation of the isolated compounds was evaluated in the SCC2095 cells. RESULTS: The major compounds were identified from ZSP. The contents, anti-proliferation activities, permeabilities, and intracellular accumulations of these compounds were also evaluated. The structure of these purified compounds were identified by comparing the NMR and MS data with those of references as rutaevine (1), limonin (2), evodol (3), obacunone (4), fraxinellone (5), dictamnine (6), maackiain (7), trifolirhizin (8), and matrine (9). The IC50 of compounds 5, 6, and 7 against SCC2095 cells were significantly lower than that of ZSP. The uptake permeability of compounds 5, 6, and 7 were 2.58 ± 0.3 × 10(-5), 4.33 ± 0.5 × 10(-5), and 4.27 ± 0.8 × 10(-5) respectively in the Caco-2 cell culture model. The intracellular concentrations of these compounds showed that compounds 5, 6, and 7 were significantly accumulated inside the cells. CONCLUSION: Based on the activity against oral carcinoma cell line as well as the absorption permeability, compound 5, 6, and 7 are selected as quality control markers for ZSP. An activity and absorption-based platform was established and successfully used for the quality control of ZSP.