過酸化水素に対するコレステロール負荷のシクロデキストリン前処理の保護効果は、RAM精子における酸化的損傷を誘発しました

3つの実験を実施して、RAM精子における過酸化水素（H2O2）または凍結誘発性損傷に対するコレステロール負荷シクロデキストリン（CLC）の保護効果を決定しました。実験1では、新鮮な射精をCLCで処理するか、治療せずに保存されました。次に、CLC処理と未処理の両方のサンプルを、35°Cで0、250、または500μMH2O2で12時間インキュベートしました。12時間のインキュベーション期間後、250または500μMH2O2の存在下でも、CLC処理された精子では運動性、生存率、および膜の完全性が高くなりました。H2O2治療は、すべての精子パラメーターに悪影響を及ぼしました（P <0.05）。ただし、CLC未治療の対応物と比較して、12時間のインキュベーション中に250または500μMH2O2の存在下であっても、治療された精子では運動性、生存率、膜の完全性が高くなりました（P <0.05）。実験2では、CLCの存在下または非存在下で精液が凍結保存されました。融解後の結果は、CLC処理された精子がコントロールと比較してより高い（P <0.05）運動性、生存率、膜の完全性を持っていることを明らかにしました。実験3では、CLC処理および未処理の精子におけるH2O2誘導酸化ストレス中にマロンジアルデヒド（MDA）濃度を決定することにより、脂質過酸化レベルを評価しました。ただし、インキュベーションのどの段階でも、MDAレベルの違い（P> 0.05）は観察されませんでした。結論として、RAM精子膜へのCLC取り込みは、H2O2または凍結誘発性酸化的損傷からそれを保護する可能性があります。RAM精子に対するCLCの凍結保護の影響は、少なくとも部分的にはその抗酸化特性から生じる可能性があります。

Three experiments were conducted to determine the protective effect of cholesterol-loaded cyclodextrin (CLC) against hydrogen peroxide (H2O2) or cryo-induced damage in ram sperm. In Experiment 1, the fresh ejaculates were either treated with CLC or remained untreated. Both CLC treated and untreated samples were then incubated with 0, 250 or 500 μM H2O2 at 35°C for 12 h. After incubation period of 12 h, the motility, viability and membrane integrity remained higher in CLC treated sperm even in the presence of 250 or 500 μM H2O2. The H2O2 treatment affected all the sperm parameters adversely (P<0.05). However, compared to CLC untreated counterpart, the motility, viability and membrane integrity remained higher (P<0.05) in treated sperm, even in the presence of 250 or 500 μM H2O2 during 12 h of incubation. In Experiment 2, semen was cryopreserved in the presence or absence of CLC. The post-thaw results revealed that CLC treated sperm has higher (P<0.05) motility, viability and membrane integrity compared to the control. In Experiment 3, lipid peroxidation levels were assessed by determining malondialdehyde (MDA) concentrations during the H2O2-induced oxidative stress in CLC treated and untreated sperm. However, no difference (P>0.05) in MDA level was observed among the groups at any stage of incubation. In conclusion, the CLC incorporation in ram sperm membrane may protects it against H2O2 or cryo-induced oxidative damage. The cryoprotective influence of CLC on ram sperm might be resulted from, at least partly, its antioxidative property.