3つの一般的なDNA挿入蛍光色素のサッカロミセスセレビシアの毒性、変異原性、および輸送

ゲル中のDNAを染色するために広く使用されている3つのDNA介在性蛍光色素の毒性、変異原性、および輸送を比較しました。臭化エチジウム（ETBR）に関する安全データは矛盾しており、非公開構造の2つの化合物（RedsafeおよびGelred）が安全な代替品として提案されています。我々の結果は、3つの化合物すべてが酵母の成長を阻害し、ゲルレッドが最も抑制性であり、細胞死を引き起こす唯一の化合物であることを示しています。ETBRとゲルレッドは、レッドサフではなく、小柄（非応答性）変異体の大規模な形成を誘導しますが、ETBRのみがミトコンドリアDNAの大規模な喪失を誘導します。3つの化合物はすべて、染色体点突然変異（Lys2-801（Amber））の復帰を増加させ、ゲルレッドは最も変異原性であり、赤視が最も少ない。これらの染料はすべてカチオン性であり、おそらく非選択的陽イオンチャネルを介して細胞によって採取されます。細胞内のETBRおよびゲル化されたグルコースに触れた輸送を測定できましたが、RedSafeの摂取は検出限界を下回っていました。3つの化合物はすべて酵母系では毒性および変異原性ですが、Redsafeはおそらくこれらの細胞による非常に限られた取り込みのために最も安全であると結論付けています。

We have compared the toxicity, mutagenicity and transport in Saccharomyces cerevisiae of three DNA-intercalating fluorescent dyes widely used to stain DNA in gels. Safety data about ethidium bromide (EtBr) are contradictory, and two compounds of undisclosed structure (Redsafe and Gelred) have been proposed as safe alternatives. Our results indicate that all three compounds inhibit yeast growth, with Gelred being the most inhibitory and also the only one causing cell death. EtBr and Gelred, but not Redsafe, induce massive formation of petite (non-respiratory) mutants, but only EtBr induces massive loss of mitochondrial DNA. All three compounds increase reversion of a chromosomal point mutation (lys2-801(amber) ), with Gelred being the most mutagenic and Redsafe the least. These dyes are all cationic and are probably taken by cells through non-selective cation channels. We could measure the glucose-energized transport of EtBr and Gelred inside the cells, while uptake of Redsafe was below our detection limit. We conclude that although all three compounds are toxic and mutagenic in the yeast system, Redsafe is the safest for yeast, probably because of very limited uptake by these cells.