ドットブロットの超高感度タンパク質検出と、半導体ポリマードットを備えたウエスタンブロット

ドットブロット上のタンパク質の超感受性蛍光イメージングと、明るく、コンパクトな、オレンジ色の半導体ポリマードット（CNPPV）を使用したウエスタンブロットを示します。ドットブロットの単一ピコグラムレベルで検出限界を達成しました。従来のウエスタンブロットを使用すると、SDS-PAGE後に50 pgのトランスフェリンとトリプシン阻害剤を検出し、PVDF膜に移しました。このプロトコルでは、PDOTとそのストレプトアビジンバイオコンジュジュゲートの調製と、ドットブロットとウエスタンブロットの手順について説明します。

We demonstrate ultrasensitive fluorescence imaging of proteins on dot blots and western blots using a bright, compact, and orange-emitting semiconducting polymer dot (CNPPV). We achieved a detection limit at the single-picogram level in dot blots; with conventional western blot, we detected 50 pg of transferrin and trypsin inhibitor after SDS-PAGE and transfer onto a PVDF membrane. In this protocol, we describe the preparation of Pdots and its streptavidin bioconjugate and the procedures of dot blot and western blots.