慢性血栓塞栓性肺高血圧症ラットモデルの肺動脈平滑筋における標準的な一過性受容体電位チャネルのアップレギュレーション

左主肺動脈（PA）の慢性結紮は、肺血管リモデリングと持続的な血管収縮をもたらします。この方法は、重度の慢性血栓塞栓性肺高血圧症（CTEPH）を模倣するために、閉塞後肺血管障害モデルを生成するために使用されています。この研究の目的は、CTEPHの根底にある細胞および分子メカニズムを調べ、潜在的な治療の証拠を提供することでした。CTEPHラットモデルは、外科的左PAライゲーション（LPAL）によって誘導されました。モデルを評価するために、右心室収縮期圧（RVSP）、肺組織化学、および血漿Dダイマー測定を実施しました。蛍光顕微鏡を使用して、FURAを介したラット遠位肺動脈平滑筋細胞の基底細胞内Ca（2+）濃度（[Ca（2+）] I）および貯蔵操作Ca（2+）侵入（SOCE）を測定するために使用されました。-2蛍光ベースの方法。標準的な過渡受容体ポテンシャルチャネル1（TRPC1）およびTRPC6の発現は、孤立した遠位肺動脈（PA）におけるウエスタンブロッティングとリアルタイムの定量PCRによって決定されました。術後2週間と5週間の時点で、RVSPはそれぞれのコントロールグループと比較してLPALグループの有意な増加を示しました。LPALはまた、右心室肥大（RVH）、遮るもののない領土での遠位肺動脈リモデリング、および持続的により高い血漿D-ダイマーレベルをもたらしました。LPALの基底[Ca（2+）] IとSOCEの増加は、遠位PAでのTRPC1およびTRPC6発現の明確なアップレギュレーションと関連していた。私たちの研究は、LPALがCTEPHの病因を模倣する血管緊張の変化を正常に再現したことを実証しました。このモデルでは、RVSPとRVHの増加は、SOCEの強化と、遠位PAのTRPC1およびTRPC6発現レベルを上方制御することに関連している可能性があります。

Chronic ligation of the left main pulmonary artery (PA) results in pulmonary vascular remodeling and sustained vasoconstriction. This method has been used to generate a postobstructive pulmonary vasculopathy model to mimic severe chronic thromboembolic pulmonary hypertension (CTEPH). The aim of this study was to examine the cellular and molecular mechanisms underlying CTEPH and to provide evidence for potential treatments. The CTEPH rat model was induced by surgical left PA ligation (LPAL). Right ventricular systolic pressure (RVSP), lung histochemistry and plasma D-dimer measurements were carried out to evaluate the model. A fluorescence microscope was used to measure the basal intracellular Ca(2+) concentration ([Ca(2+)]i) and store-operated Ca(2+) entry (SOCE) in rat distal pulmonary arterial smooth muscle cells through a Fura-2 fluorescence-based method. The expression of the canonical transient receptor potential channel 1 (TRPC1) and TRPC6 was determined by western blotting and real-time quantitative PCR in isolated distal pulmonary arteries (PA). At the time points of 2 and 5 weeks postsurgery, the RVSP showed significant increases in the LPAL groups in comparison with the respective control groups. LPAL also led to right ventricular hypertrophy (RVH), distal pulmonary arterial remodeling in unobstructed territories and persistently higher plasma D-dimer levels. Increases of the basal [Ca(2+)]i and SOCE in LPAL were associated with a clear upregulation of TRPC1 and TRPC6 expression in the distal PA. Our study demonstrated that LPAL successfully reproduced the vascular tone changes that mimic CTEPH pathogenesis. In this model, the increased RVSP and RVH are likely related to enhanced SOCE and upregulated TRPC1 and TRPC6 expression levels in the distal PA.