ブドウ球菌における迅速な表現型スクリーニングのためのトランスポゾン変異体ライブラリーのバッチ変換

グラム陽性病原体ブドウ球菌では、トランスポゾン変異誘発は、特定の表現型の多数の変異体をスクリーニングする有用な方法です。ただし、トランスポゾン変異体ライブラリーの構築は、研究室で数か月の作業と検証を取ることができます。この章では、既存のトランスポゾン変異を新しい遺伝的背景にバッチ変換する方法について説明します。黄色ブドウ球菌の形質導入は、最も一般的に使用される実験室株で迅速かつ簡単に達成されます。本明細書に記載されている方法は、変換を利用して、新しいライブラリの迅速な作成を促進し、表現型レポーターコンストラクトを含む株の迅速なスクリーニングを促進します。

In the gram-positive pathogen Staphylococcus aureus, transposon mutagenesis is a useful method of screening large numbers of mutants for a given phenotype. However, constructing a transposon mutant library can take several months of work and validation in the laboratory. In this chapter, we describe a method for batch transduction of existing transposon mutations into new genetic backgrounds. Transduction in S. aureus is accomplished quickly and easily in most commonly used laboratory strains. The method described herein utilizes transduction to facilitate the rapid creation of new libraries and quick screening in strains containing phenotypic reporter constructs.