周囲UV放射下のP-フェニレンジアミンによるミトコンドリアアポトーシスにおけるカテプシンBの関与

パラニトロアニリンの誘導体であるパラフェニレンジアミン（PPD）は、最も一般的に酸化的毛染料と永久タトゥーの成分として使用されています。周囲の紫外線下でPPDの光毒性の可能性を研究しました。PPDは光学されており、紫外線の曝露下で新しい光生成物を形成します。PPDは、MTTおよびNRUテストを介してヒトケラチノサイト細胞（HACAT）の細胞生存率の濃度依存性の低下を示しています。有意な細胞内ROS生成は、DCFDAアッセイによって測定されました。それは、単一鎖DNA休憩、小核、およびCPD形成を介して酸化的DNA損傷を引き起こしました。リソソームとミトコンドリアの両方は、免疫蛍光、リアルタイムPCR、およびウエスタンブロット分析によるリソソームの不安定化とカテプシンBの放出によって証明されたPPD誘導アポトーシスの主要な標的です。カテプシンBは、ミトコンドリアからのシトクロムCの放出を誘導するアクティブなTBIDへのプロセス入札。ミトコンドリア脱分極は、透過型電子顕微鏡を通じて報告されました。カテプシン阻害剤は、PPD処理細胞におけるシトクロムCの放出を減少させました。したがって、研究は、PPDが周囲UV放射の両方でリソソームとミトコンドリアの関与を​​介してアポトーシスにつながることを示唆しています。したがって、染色成分の性質を光増感する前に、人間の安全のための化粧品として市場に出る前にテストする必要があります。

Paraphenylenediamine (PPD), a derivative of paranitroaniline has been most commonly used as an ingredient of oxidative hair dye and permanent tattoos. We have studied the phototoxic potential of PPD under ambient ultraviolet radiation. PPD is photodegraded and form a novel photoproduct under UV A exposure. PPD shows a concentration dependent decrease in cell viability of human Keratinocyte cells (HaCaT) through MTT and NRU test. Significant intracellular ROS generation was measured by DCFDA assay. It caused an oxidative DNA damage via single stranded DNA breaks, micronuclei and CPD formation. Both lysosome and mitochondria is main target for PPD induced apoptosis which was proved through lysosomal destabilization and release of cathepsin B by immunofluorescence, real time PCR and western blot analysis. Cathepsin B process BID to active tBID which induces the release of cytochrome C from mitochondria. Mitochondrial depolarization was reported through transmission electron microscopy. The cathepsin inhibitor reduced the release of cytochrome C in PPD treated cells. Thus study suggests that PPD leads to apoptosis via the involvement of lysosome and mitochondria both under ambient UV radiation. Therefore, photosensitizing nature of hair dye ingredients should be tested before coming to market as a cosmetic product for the safety of human beings.