剥離方法がM2マクロファージの表現型と機能に与える影響

細胞剥離の方法は、in vitroで培養されたヒトマクロファージの表現型と機能に影響します。ただし、M1またはM2偏光マクロファージの二次特性評価に対する細胞剥離技術の影響を定義する比較研究は、文献にはほとんど存在しません。この研究では、トリプシン、アキュター、EDTA、PBS、および細胞のスクレイピングの影響を評価しました。A。細胞回復、B。表現型およびC.我々のデータは、トリプシンまたはアキュターゼへの曝露が実行可能な細胞の非常に効率的な回復をもたらす一方で、そのような化学的切断により、細胞機能に相関する変化を伴う選択M2細胞表面マーカーが喪失することを示しています。対照的に、表現型と機能は、氷上のEDTAによる剥離後に維持されます。私たちのデータは、マクロファージの分離の方法論の「些細な」変化の一見「些細な」変化が、偏光実験の結果に劇的に影響を与える可能性のある細胞表現型と機能の変化と深い変化の両方を誘導することを示唆しています。

The methods of cell detachment influence phenotype and function of human macrophages cultured in vitro. However, comparative studies defining the influence of cell detachment techniques on secondary characterization of M1 or M2 polarized macrophages are largely absent from the literature. In this study we evaluated the impact of trypsin, accutase, EDTA, PBS, and cell scraping on: A. cell recovery, B. phenotype and C. function of in vitro polarized macrophages. Our data demonstrate that while exposure to trypsin or accutase yields highly efficient recovery of viable cells, such chemical cleavage results in loss of select M2 cell surface markers with correlative changes in cell function. In contrast, phenotype and function are maintained following detachment by EDTA on ice. Our data suggest that seemingly "trivial" changes in methodologies for macrophage detachment induce both variable and profound changes on cell phenotype and function which can dramatically impact the results of polarization experiments.