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はじめに：尖端乳頭からのヒトの歯髄細胞（DPSC）および幹細胞は、損傷した歯組織の修復に使用されています。ヒト血小板溶解物（PL）は、歯科幹細胞の大規模拡張のための胎児ウシ血清（FBS）の代替として提案されています。しかし、ヒトの歯科幹細胞の増殖と分化のためのPLの生物学的効果と最適濃度はまだ解明されていません。 方法論：DPSCおよびSCAP細胞は、根の発達の段階で、若い健康なドナーの影響を受けた第3臼歯から分離され、フローサイトメトリーを使用してマーカーによって識別されました。比較のために、細胞はPL（1％、5％、および10％）とFBを含む培地で培養され、その後の骨形成/歯原性分化の誘導を行いました。文化は分析されました。形態、成長特性、ミネラル化ポテンシャル（アリザリンレッド法）およびELISAおよびリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（QPCR）を使用した分化マーカー。 結果：FBSと比較して、細胞を5％PL（7倍の倍増時間）で処理すると、DPSCとSCAPの増殖率が大幅に増加しました。5％PLは、アルカリホスファターゼ活性、オステオカルシンおよびオステオポンチン、カルシウム沈着およびQ-PCRの測定によって示されるように、DPSCとSCAPの鉱化化分化も強化しました。 結論：我々の調査結果は、DPSCの5％血小板溶解物、増殖、骨/骨形成を使用し、短期間（15日間）SCAPを使用することが大幅に改善されたことを示唆しています。これは、骨再生における歯科幹細胞の拡大に最適な濃度としての使用を意味する可能性があります。
はじめに：尖端乳頭からのヒトの歯髄細胞（DPSC）および幹細胞は、損傷した歯組織の修復に使用されています。ヒト血小板溶解物（PL）は、歯科幹細胞の大規模拡張のための胎児ウシ血清（FBS）の代替として提案されています。しかし、ヒトの歯科幹細胞の増殖と分化のためのPLの生物学的効果と最適濃度はまだ解明されていません。 方法論：DPSCおよびSCAP細胞は、根の発達の段階で、若い健康なドナーの影響を受けた第3臼歯から分離され、フローサイトメトリーを使用してマーカーによって識別されました。比較のために、細胞はPL（1％、5％、および10％）とFBを含む培地で培養され、その後の骨形成/歯原性分化の誘導を行いました。文化は分析されました。形態、成長特性、ミネラル化ポテンシャル（アリザリンレッド法）およびELISAおよびリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（QPCR）を使用した分化マーカー。 結果：FBSと比較して、細胞を5％PL（7倍の倍増時間）で処理すると、DPSCとSCAPの増殖率が大幅に増加しました。5％PLは、アルカリホスファターゼ活性、オステオカルシンおよびオステオポンチン、カルシウム沈着およびQ-PCRの測定によって示されるように、DPSCとSCAPの鉱化化分化も強化しました。 結論：我々の調査結果は、DPSCの5％血小板溶解物、増殖、骨/骨形成を使用し、短期間（15日間）SCAPを使用することが大幅に改善されたことを示唆しています。これは、骨再生における歯科幹細胞の拡大に最適な濃度としての使用を意味する可能性があります。
INTRODUCTION: Human dental pulp cells (DPSCs) and stem cells from apical papilla have been used for the repair of damaged tooth tissues. Human platelet lysate (PL) has been suggested as a substitute for fetal bovine serum (FBS) for large scale expansion of dental stem cells. However, biological effects and optimal concentrations of PL for proliferation and differentiation of human dental stem cells remain to be elucidated. METHODOLOGY: DPSCs and SCAP cells were isolated from impacted third molars of young healthy donors, at the stage of root development and identified by markers using flow cytometry. For comparison the cells were cultured in media containing PL (1%, 5% and 10%) and FBS, with subsequent induction for osteogenic/odontogenic differentiation. The cultures were analyzed for; morphology, growth characteristics, mineralization potential (Alizarin Red method) and differentiation markers using ELISA and real time -polymerase chain reaction (qPCR). RESULTS: The proliferation rates of DPSCs and SCAP significantly increased when cells were treated with 5% PL (7X doubling time) as compared to FBS. 5% PL also enhanced mineralized differentiation of DPSCs and SCAP, as indicated by the measurement of alkaline phosphatase activity, osteocalcin and osteopontin, calcium deposition and q-PCR. CONCLUSION: Our findings suggest that using 5% platelet lysate, proliferation and osteo/odontogenesis of DPSCs and SCAP for a short period of time (15 days), was significantly improved. This may imply its use as an optimum concentration for expansion of dental stem cells in bone regeneration.
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