ヒト肝腫HepG2細胞の培養と機能的特性評価

肝腫細胞株は、一次ヒト肝細胞のin vitroの代替品として頻繁に使用されます。細胞株は、無制限の寿命、安定した表現型、高可用性、および簡単な取り扱いによって特徴付けられます。しかし、それらの主な制限は、肝細胞と比較していくつかの代謝活性の低い発現です。HepG2は、薬物代謝および肝毒性研究で最も一般的に使用されるヒト肝腫です。HepG2細胞は、増殖率が高い非腫瘍性細胞であり、多くの分化した肝機能を実行する上皮様形態です。この章では、HEPG2細胞の凍結、解凍、およびサブカルチャー手順について説明します。さらに、HEPG2細胞における脂質蓄積、グリコーゲン貯蔵、尿素合成、第I相および第II相薬代謝活性を評価するためのプロトコルを提供します。

Hepatoma cell lines are frequently used as in vitro alternatives to primary human hepatocytes. Cell lines are characterized by their unlimited life span, stable phenotype, high availability, and easy handling. However, their major limitation is the lower expression of some metabolic activities compared with hepatocytes. HepG2 is a human hepatoma that is most commonly used in drug metabolism and hepatotoxicity studies. HepG2 cells are nontumorigenic cells with high proliferation rates and an epithelial-like morphology that perform many differentiated hepatic functions. In this chapter, freezing, thawing, and subculturing procedures for HepG2 cells are described. We further provide protocols for evaluating lipid accumulation, glycogen storage, urea synthesis, and phase I and phase II drug metabolizing activities in HepG2 cells.