原核生物発現系で発現した組換えヒトCD90タンパク質の抗原評価

分化のクラスター90（CD90、THY-1）は、がん幹細胞（CSC）を含むいくつかの癌細胞で最も重要なバイオマーカーの1つとして提案されています。CD90は、潜在的な正常な幹細胞およびCSCSバイオマーカーと見なされており、肺がん幹細胞、肝細胞癌細胞および高悪性度膠腫でも同定されています。真核生物宿主システムの使用には、複雑な手順が含まれ、頻繁にタンパク質収量が低くなります。大腸菌における組換えタンパク質の発現は、真核生物宿主細胞よりも比較的簡単です。組換えタンパク質の大規模生産の可能性により、このシステムは経済的生産プラットフォームになりました。この研究では、大腸菌発現宿主細胞でヒトCD90（EXCD90）抗原（GLN15-CYS130）の膜外ドメインを発現しました。精製された組換え抗原のエピトープの完全性は、5E10抗CD90モノクローナル抗体を使用した抗体抗原相互作用と、フローサイトメトリー実験におけるCD90（+）細胞のELISAおよび蛍光染色を介した結合研究によって確認されました。

Cluster of Differentiation 90 (CD90, Thy-1) has been proposed as one of the most important biomarkers in several cancer cells including cancer stem cells (CSCs). CD90 is considered as a potential normal stem cell and CSCs biomarker and also has been identified in lung cancer stem cells, hepatocellular carcinoma cells and high-grade gliomas. Using eukaryotic host systems involves complex procedures and frequently results in low protein yields. The expression of recombinant proteins in Escherichia coli is comparatively easier than eukaryotic host cells. The potential of large scale production of recombinant protein has made this system an economic production platform. In this study we expressed the extra-membrane domain of human CD90 (exCD90) antigen (Gln15-Cys130) in E. coli expression host cells. The epitope integrity of purified recombinant antigen was confirmed by antibody-antigen interaction using 5E10 anti-CD90 monoclonal antibody and binding study through ELISA and florescent staining of CD90(+) cells in a flow cytometry experiment.