CACO2細胞のグルコース吸収に対するレプチン効果の出現は、それらの分化レベルに依存します

非標識：バックドラウンド/目的：この作業の目的は、モデルとしてCACO-2細胞を使用して、グルコース吸収にアピカルに追加されたレプチンの作用の効果とメカニズムを研究することでした。 方法：細胞をインサートで成長させ、コンフルエンス後の異なる時点でレプチンで処理しました。放射性標識グルコースを上部チャンバーに添加し、下部チャンバーからサンプルを収集し、放射能のためにアッセイしました。 結果：グルコース吸収は、分化のレベルの増加とともに増加し、グルコーストランスポーターのタンパク質発現レベルの増加に関連していました。レプチンは、コンフルエンス後の16日目までにグルコース吸収を減少させました。これは、頂端レプチン受容体が現れ始めた時期です。この阻害効果は、コンフルエンス後の期間が長くなるほど高くなり、23日目に顕著になりました。ホルモン効果は、グルコーストランスポーター数（SGLT1とGLUT2）の数の減少とNa+の活性の減少を介して媒介されることがわかりました。/K+ ATPaseは、酵素活性化因子の存在下および非存在下で解放された無機リン酸の量を測定することによってアッセイされました。 結論：23日目の合流点までに、CACO-2細胞は分化し、腸輸送研究のモデルとして使用するのに適していると結論付けられました。

UNLABELLED: Backdround/Aims: The aim of this work was to study the effect and mechanism of action of leptin added apically, on glucose absorption, using Caco-2 cells as a model. METHODS: Cells were grown on inserts and treated with leptin, at different time points after confluence. Radiolabelled glucose was added to the upper chamber and samples from the lower chamber were collected and assayed for radioactivity. RESULTS: Glucose absorption increased with an increase in the level of differentiation and was associated with an increase in the protein expression level of glucose transporters. Leptin reduced glucose absorption only by day 16 after confluence, the time at which apical leptin receptors started appearing. This inhibitory effect became higher the longer the post confluence period, and was prominent on day 23. The hormone effect was found to be mediated via a decrease in the number of glucose transporters (SGLT1 and GLUT2) and a decrease in the activity of the Na+/K+ ATPase which was assayed by measuring the amount of inorganic phosphate liberated in presence and absence of enzyme activators. CONCLUSION: It was concluded that by day 23 post confluence, Caco-2 cells are differentiated and are appropriate to use as a model for intestinal transport studies.