C2C12筋管収縮は、単球化学誘導を誘導するためにNF-κB依存的にCCL2を放出します

運動後の筋肉の炎症は、炎症性サイトカインとケモカインの発現によって特徴付けられます。運動は、循環単球に由来する筋肉マクロファージを増加させます。しかし、筋肉細胞自体が循環する単球を引き付けるのか、それとも根本的なメカニズムとは何かは不明です。C2C12ミオチューブ収縮を引き起こす電気刺激（ES）のin vitroシステムを使用して、単球の化学誘導が媒介化学誘引物質を引き起こし、調査したかどうかを調査しました。ES契約筋管からの条件付き培地は、ボイデンチャンバー全体でTHP-1単球の堅牢な化学誘導を引き起こしました。ESに続いて、いくつかの既知の単球ケモカイン[C-Cモチーフリガンド2（CCL2）およびC-X-Cモチーフリガンド（CXCL）1、-2、および-5]の発現が上昇しましたが、これらのうち、組換えCCL2のみがモノシテ移動を効果的に再現しました。CCL2を分泌した電気刺激筋管、およびTHP-1単球のCCL2受容体（CCR2）に抗ガイズするCCL2の中和を分泌した。ミオシンII-ATPase阻害剤であるN-ベンジル-P-トルエンスルホンアミド（BTS）は、ES誘発性筋管収縮を防止しましたが、CCL2遺伝子の発現と分泌は防止されませんでした。膜 - 透過性カルシウムキレーターBapta-Amは、ES誘発性CCL2分泌を減少させました。したがって、機械的収縮ではなく電気脱分極は、部分的なカルシウム入力でCCL2の上昇を促進します。ESはNF-κB経路を活性化しました。NF-κB阻害剤は、ES誘発性CCL2遺伝子の発現と分泌を減少させ、ES誘発THP-1化学誘導を抑制しました。したがって、NF-κB調節CCL2分泌を介して、電気的に刺激された筋管化学誘発性単球です。

Muscle inflammation following exercise is characterized by expression of inflammatory cytokines and chemokines. Exercise also increases muscle macrophages derived from circulating monocytes. However, it is unknown whether muscle cells themselves attract circulating monocytes, or what is the underlying mechanism. We used an in vitro system of electrical stimulation (ES) causing C2C12 myotube contraction to explore whether monocyte chemoattraction ensues and investigated the mediating chemoattractants. Conditioned medium from ES-contracted myotubes caused robust chemoattraction of THP-1 monocytes across Boyden chambers. Following ES, expression of several known monocyte chemokines [C-C motif ligand 2 (CCL2) and C-X-C motif ligand (CXCL)1, -2, and -5] was elevated, but of these, only recombinant CCL2 effectively reproduced monocyte migration. Electrically stimulated myotubes secreted CCL2, and neutralization of CCL2 in conditioned medium or antagonizing the CCL2 receptor (CCR2) in THP-1 monocytes inhibited ES-induced monocyte migration. N-benzyl-p-toluene sulfonamide (BTS), a myosin II-ATPase inhibitor, prevented ES-induced myotube contraction but not CCL2 gene expression and secretion. The membrane-permeant calcium chelator BAPTA-AM reduced ES-induced CCL2 secretion. Hence, electrical depolarization, rather than mechanical contraction, drives the rise in CCL2, with partial calcium input. ES activated the NF-κB pathway; NF-κB inhibitors reduced ES-induced CCL2 gene expression and secretion and repressed ES-induced THP-1 chemoattraction. Thus, electrically stimulated myotubes chemoattract monocytes through NF-κB-regulated CCL2 secretion.