ヒト多核核白血球上の走化性ペプチドの特定の受容体部位

合成N-ホルミルメチオニルペプチドは、ヒト多核核白血球の走化性誘引剤です。これらのペプチドの明確に定義された構造活性関係は、走化性反応を引き出すことで、ペプチドと特定の細胞結合部位との相互作用が走化性を開始する可能性があることを示唆しています。高い特異的放射能を持つ強力な走化性ペプチドであるトリチン化N----メチオリオニル - レウチル - フェニルアラニン（FMET-LEU- [3H] PHE）を使用することにより、ヒト多形性白血球の結合部位を直接同定しました。FMET-LEU- [3H] PHEの多核白血球への結合は、急速（T1/2は2分未満）であり、可逆的です。FMET-LEU- [3H-A1PHEと結合部位との相互作用の平衡解離定数（KD）は、37度で12〜14 nmです。結合部位の数は、セルあたり約2000です。一連のn-フィルミルメチオニルペプチドの結合部位の特異性は、ペプチドに対する走化性応答の特異性を正確に反映しています。FMET-METはFMET-LEUより大きいFMET-LEUよりも大きいFMET-METよりも大きい）、FPHE-METはN-ホルミルメチオニルペプチドの走化性活性の競合拮抗薬であり、6x10-5 Mの計算kdを持っています。また、FMET-LEU [3H] PHE結合の結合を最大的に阻害することは、多核白血球で最も高くなりました。FMET-LEU- [3H] PHEのヒト赤血球への結合は検出できませんでした。これらのデータは、FMET-LEU- [3H] PHEを使用して、ヒト多形性白血球上の走化性ペプチドの結合部位を識別できることを示しています。これらの結合部位は、N-ホルミルメチオニルペプチドに対する運動性細胞の特定の反応を開始する可能性があります。

Synthetic N-formylmethionyl peptides are chemotactic attractants for human polymorphonuclear leukocytes. The well-defined structure-activity relationship of these peptides in eliciting a chemotactic response suggests that the interaction of the peptides with a specific cellular binding site may initiate chemotaxis. By using tritiated N-formylmethionyl-leucyl-phenylalanine (fMet-Leu-[3H]Phe), a potent chemotactic peptide with high specific radioactivity, we have directly identified binding sites on human polymorphonuclear leukocytes. Binding of fMet-Leu-[3H]Phe to polymorphonuclear leukocytes is rapid (t1/2 less than 2 min) and reversible. The equilibrium dissociation constant (KD) for the interaction of fMet-Leu-[3H-A1Phe with the binding site is 12-14 nM at 37 degrees. The number of binding sites is approximately 2000 per cell. The specificity of the binding sites for a series of N-formylmethionyl peptides exactly reflects the specificity of the chemotactic response to the peptides in that they compete for the binding sites and initiate chemotaxis with the same order of potency (fMet-Leu-Phe greater than fMet-Met-Met greater than fMet-Phe greater than fMet-Leu greater than fMet),fPhe-Met is a competitive antagonist of the chemotactic activity of N-formylmethionyl peptides and has a calculated KD of 6x10-5 M. FPhe-Met also half-maximally inhibits binding of fMet-Leu[3H]Phe binding was the highest in polymorphonuclear leukocytes. No binding of fMet-Leu-[3H]Phe to human erythrocytes could be detected. These data indicate that fMet-Leu-[3H]Phe can be used to identify binding sites for chemotactic peptides on human polymorphonuclear leukocytes. It is likely that these binding sites initiate the specific response of motile cells to N-formylmethionyl peptides.