[Burkholderia sp Zyb002からのサーモスタベリパーゼAによる変異体のスクリーニング]

目的：リパーゼLIPAの適用を拡大するためのタンパク質工学技術により、Burkholderia cecapia Zyb002からのLipaの熱安定性を改善しました。 方法：リパーゼLIPAのB因子値に基づいて、一連の潜在的な突然変異ホットスポットが反復飽和変異誘発のために選択され、次に対応する小さな突然変異遺伝子ライブラリーが構築され、高熱変異体がスクリーニングされました。 結果：上記の突然変異ライブラリから、55度Cの酵素の半減期が1.7から2.2倍増加した一連の変異体を取得しました。 結論：B因子反復テスト（B-FIT）は、熱安定性株を変異させるために実行可能です。

OBJECTIVE: We improved the thermostability of LipA from Burkholderia cecapia ZYB002 by protein engineering technology to expand the application of lipase LipA. METHOD: On the basis of B-factor value of lipase LipA, series of potential mutation hotspots were selected for iterative saturation mutagenesis and the corresponding small mutation gene libraries were then constructed to screen the hyperthermal variants. RESULTS: From the above mutation libraries, we obtained a series of mutants whose enzyme half-life at 55 degrees C increased by 1.7 to 2.2-fold. CONCLUSION: B-factor iterative test (B-FIT) is feasible to mutate thermostable strains.