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The Journal of biological chemistry1989Aug15Vol.264issue(23)

ダッフィー血液型抗原性を運ぶ赤血球膜タンパク質複合体の精製と特性化プラスモディウムvivaxおよびプラスモディウムノウィラリスマラリア寄生虫の可能な受容体

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PMID:2668273DOI:
文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, U.S. Gov't, P.H.S.
概要
Abstract

抗FY6と名付けられたマウスモノクローナル抗体は、FY(A-B)表現型のものを除くすべてのヒト赤血球を凝集させ、ダフィー抗原の精製と特性評価に使用しました。Duffy抗原は、異なるサブユニットで構成される多量体赤血球膜タンパク質であり、そのうち1つだけがPDタンパク質と指定されたもので、マウスモノクローナル抗体抗FY6と免疫ブロットで反応します。赤血球から得られたアフィニティ培養培養洗剤可溶性抗原抗原抗体複合体は、125iで表面標識されたもので、ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分離すると、複雑なバンドパターンが生成されました。免疫ブロットで抗FY6と反応するタンパク質は、PAおよびPB(100 kDaを超える)およびPD(36-46 kDa)です。電気溶出されたPDタンパク質凝集体とPAおよびPBタンパク質と同様の分子量のバンドを生成します。電気溶出されたPAおよびPBタンパク質は、PDタンパク質を生成する分解を分解します。PDタンパク質のオリゴマーとモノマーは、Duffy抗原を運ぶ赤血球に存在し、FY(A-B-)細胞には存在しません。68〜21 kDaの範囲の分子量の他の6つのタンパク質は、関連するか、PDタンパク質と共培養します。これらのタンパク質は、ダフィー抗原陽性細胞にのみ存在します。PDタンパク質は、FY(A+B-)およびFY(A-B+)細胞で指紋分析によって異なります。ヒト抗血清は、マウスモノクローナル抗体抗FY6と同じダフィ抗原を運ぶ赤血球の同じタンパク質を識別します。

抗FY6と名付けられたマウスモノクローナル抗体は、FY(A-B)表現型のものを除くすべてのヒト赤血球を凝集させ、ダフィー抗原の精製と特性評価に使用しました。Duffy抗原は、異なるサブユニットで構成される多量体赤血球膜タンパク質であり、そのうち1つだけがPDタンパク質と指定されたもので、マウスモノクローナル抗体抗FY6と免疫ブロットで反応します。赤血球から得られたアフィニティ培養培養洗剤可溶性抗原抗原抗体複合体は、125iで表面標識されたもので、ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分離すると、複雑なバンドパターンが生成されました。免疫ブロットで抗FY6と反応するタンパク質は、PAおよびPB(100 kDaを超える)およびPD(36-46 kDa)です。電気溶出されたPDタンパク質凝集体とPAおよびPBタンパク質と同様の分子量のバンドを生成します。電気溶出されたPAおよびPBタンパク質は、PDタンパク質を生成する分解を分解します。PDタンパク質のオリゴマーとモノマーは、Duffy抗原を運ぶ赤血球に存在し、FY(A-B-)細胞には存在しません。68〜21 kDaの範囲の分子量の他の6つのタンパク質は、関連するか、PDタンパク質と共培養します。これらのタンパク質は、ダフィー抗原陽性細胞にのみ存在します。PDタンパク質は、FY(A+B-)およびFY(A-B+)細胞で指紋分析によって異なります。ヒト抗血清は、マウスモノクローナル抗体抗FY6と同じダフィ抗原を運ぶ赤血球の同じタンパク質を識別します。

A murine monoclonal antibody, named anti-Fy6, which agglutinates all human red cells except those of Fy(a-b) phenotype was used for purification and characterization of Duffy antigens. Duffy antigens are multimeric red cell membrane proteins composed of different subunits of which only one, designated pD protein, reacts in immunoblots with the murine monoclonal antibody anti-Fy6. Affinity-purified detergent-soluble antigen-antibody complex obtained from red cells, surface-labeled with 125I yielded a complex pattern of bands when separated by polyacrylamide gel electrophoresis. Proteins that react with anti-Fy6 in immunoblots are: pA and pB (greater than 100 kDa) and pD (36-46 kDa). Electroeluted pD protein aggregates and generates bands of similar molecular mass to pA and pB proteins. Electroeluted pA and pB proteins disaggregate yielding pD protein. Oligomers and monomers of pD protein are present in red cells carrying Duffy antigens and absent in Fy(a-b-) cells. Six other proteins of molecular weight ranging from 68 to 21 kDa either associate or co-purify with pD protein. These proteins are only present in Duffy antigen positive cells. The pD protein is different in Fy(a+b-) and Fy(a-b+) cells by fingerprint analysis. Human antisera identify the same proteins in red cell carrying Duffy antigens as the murine monoclonal antibody anti-Fy6.

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