SARM LGD-4033を含む闇市場製品のin vitro代謝研究

アスリートは、アスリートがパフォーマンスを向上させるためによく使用されます。ただし、ステロイドの使用はかなりの副作用につながります。非ステロイド選択的アンドロゲン受容体モジュレーター（SARM）は、これまで承認されていないが、ステロイドよりも好ましいアナボリック/アンドロゲン比を持ち、副作用が少ないようです。したがって、2008年以来、世界のアンチドーピング機関（WADA）により、SARMの使用は禁止されています。これらのサルマのいくつかは、闇市場で検出されています。代謝研究は、ドーピングコントロール研究所による新興物質の効果的な制御を確保するために、最良の尿マーカーを特定するために不可欠です。闇市場製品には多くの場合、非医薬品グレードの物質が含まれているため、代謝を解明するためには人間の排泄研究の代替品が必要です。SARM LGD-4033を封じ込めたラベルの闇市場製品は、インターネットで購入しました。闇市場製品の純度検証により、他の汚染物質なしでLGD-4033が検出されました。ヒト肝臓ミクロソームとS9肝臓画分を使用して、第I相および第II相（グルクロン酸拡張）代謝研究を実施しました。in vitro代謝研究のサンプルは、ガスクロマトグラフィー（TANDEM）質量分析（GC-MS（/MS））、液体クロマトグラフィー - ハイ解像度タンデム質量分析（LC-（HR）MS/MS）によって分析されました。LC-HRMS産物イオンスキャンにより、親化合物の典型的なフラグメントイオンを識別し、代謝物構造をさらに決定することができました。合計5つの代謝物が検出され、すべてがLGD-4033のピロリジン環で修飾されました。代謝修飾は、ケト形成（M1）またはピロリジン環（M2）、ヒドロキシル化とメチル化（M3/M4）およびジヒドロキシル化（M5）の切断と組み合わせたヒドロキシル化からの範囲でした。親化合物とM2もグルクロニド結合として検出されました。Copyright©2016 John Wiley＆Sons、Ltd。

Anabolic agents are often used by athletes to enhance their performance. However, use of steroids leads to considerable side effects. Non-steroidal selective androgen receptor modulators (SARMs) are a novel class of substances that have not been approved so far but seem to have a more favourable anabolic/androgenic ratio than steroids and produce fewer side effects. Therefore the use of SARMs has been prohibited since 2008 by the World Anti-Doping Agency (WADA). Several of these SARMs have been detected on the black market. Metabolism studies are essential to identify the best urinary markers to ensure effective control of emerging substances by doping control laboratories. As black market products often contain non-pharmaceutical-grade substances, alternatives for human excretion studies are needed to elucidate the metabolism. A black market product labelled to contain the SARM LGD-4033 was purchased over the Internet. Purity verification of the black market product led to the detection of LGD-4033, without other contaminants. Human liver microsomes and S9 liver fractions were used to perform phase I and phase II (glucuronidation) metabolism studies. The samples of the in vitro metabolism studies were analyzed by gas chromatography-(tandem) mass spectrometry (GC-MS(/MS)), liquid chromatography-high resolution-tandem mass spectrometry (LC-(HR)MS/MS). LC-HRMS product ion scans allowed to identify typical fragment ions for the parent compound and to further determine metabolite structures. In total five metabolites were detected, all modified in the pyrrolidine ring of LGD-4033. The metabolic modifications ranged from hydroxylation combined with keto-formation (M1) or cleavage of the pyrrolidine ring (M2), hydroxylation and methylation (M3/M4) and dihydroxylation (M5). The parent compound and M2 were also detected as glucuronide-conjugates. Copyright © 2016 John Wiley & Sons, Ltd.